لیست اختراعات حسين آقا ملايي و مهرداد موسي زاده مقدم و محمد هيئت
انتقال DNA خارجي با راندمان بالا به داخل سلول هاي باكتريايي ميزبان يكي از مهمترين مراحل در زيست فناوري ميكروبي مي باشد. براي اين منظور چند روش مرسوم مي باشد كه در بين آن ها روش كلسيم كلرايد سرد از جمله مهمترين و ارزان ترين روش هاي انتقال DNA به درون سلول هاي باكتريايي است كه براي باكتري هاي گرم منفي مانند E.coli بسيار كاربرد دارد. به طور معمول راندمان انتقال DNA در اين روش 105 – 107 كلوني براي يك ميكروگرم از DNA خارجي مي باشد. همچنين برخي از باكتري هاي گرم مثبت مانند B.subtilis كه در زيست فناوري ميكروبي كاربرد دارد مي توانند DNA را از طريق يك فرايند طبيعي جذب نمايند اما ميزان راندمان آن نيز بسيار پايين مي باشد. لذا با توجه به اهميت اين فرايند تلاش هاي بسياري به منظور بهينه سازي روش هاي دستي مرسوم كه در بسياري از آزمايشگاه ها كاربردي و ارزان مي باشند صورت پذيرفته است. در روش ابداعي ارايه شده ادعا مي شود كه با استفاده از يك پپتيد كاتيونيك تراوا كننده غشاء (Cell Permeable Peptide) به عنوان يك عامل نوين و مؤثر مي توان بر پايه روش كلريد كلسيم DNA خارجي را با نرخ بالايي به باكتري گرم منفي و گرم مثبت انتقال داد. در اين روش به عنوان مدل، پلاسميدهاي pET-28a( ) و pGEX4T-1 به طور جداگانه به درون باكتري E.coli و همچنين پلاسميد pWB980 به درون باكتري B.subtilis در حضور چهار غلظت از پپتيد ( 1 ،2 ،3 و 6 ميكروگرم در ميلي ليتر) منتقل گرديدند. در حضور غلظت 1 ميكروگرم در ميلي ليتر پپتيد (بالاترين راندمان انتقال بدست آمده) ، انتقال پلاسميد pET-28a( ) و pGEX4T-1 به درون باكتري E.coli به ترتيب 7/4 و 6/4 برابر روش استاندارد كلريد كلسيم مي باشد. همچنين ورود پلاسميد pWB980 به درون باكتري B.subtilisبه طور مؤثري در حضور غلظت 2 ميكروگرم در ميلي ليتر پپتيد افزايش يافت كه اين مقدار 4/6 برابر بيشتر از كنترل مي باشد.
موارد یافت شده: 1