ايجاد استرپتومايسز كلاولي جروس ايرانا نوتركيب با قابليت توليد مقادير زياد آنتي بيوتيك كلاولانيك اسيد كلاولانيك اسيد اولين مهاركننده ß- لاكتاماز است كه مصرف باليني آن از سال 1981 آغاز شده است. محصول تجاري آگمنتين (كو آموكسي كلاو ) از تلفيق كلاولانيك اسيد با آموكسي¬سيلين و محصول تجاري تيمنتين از تلفيق كلاولانيك اسيد با تيكارسيلين بدست مي¬آيد. در اين پژوهش، توسط مطالعات مختلف بيوافورماتيك و بررسي نتايج آزمايشات محققين ديگر، ژن cas2 جهت تهيه كانستراكت هاي نوتركيب انتخاب شدند. استخراج DNA ژنومي از استرپتومايسز (شكل 1) انجام شد و ژن cas2 توسط PCR و پرايمرهاي طراحي و دست كاري شده، تكثير (شكل 2) و استخراج گرديد و سپس به وكتور pMT3206 (شكل 3) استخراج شده از استرپتومايسز سيلي كالر متصل شد. ترانسفورماسيون پروتوپلاست هاي استرپتومايسز ليويدانس با وكتور pMT3206 و همچنين ناقلين واجد ژن و cas2 به صورت ligation mixture انجام گرفت. سپس پلازميد نوتركيب از سوش هاي نوتركيب جدا و خالص سازي شد و پروتوپلاستهاي استرپتومايسز كلاولي جروس با آنها انجام شد. سوش نوتركيب به نام استرپتومايسز كلاوليجروس ايركاس شناخته مي شود. ميزان توليد آنتي بيوتيك ميزان كلاولانيك اسيد اين سوش با روش HPLC و بيواسي بررسي شد ( شكل 5). نتايج نشان دادند كه سوش نوتركيب ايركاس 5 برابر بيشتر از سوش طبيعي آنتي بيوتيك كلاولانيك اسيد توليد مي كند. البته اين مقدار با بهينه سازيهاي بيشتر قابل افزايش نيز هست.

ساخت كيت تشخيصي جهش هاي شايع بتا تالاسمي بطور همزمان و هوشمند توسط تكنيك Real time PCR Construct of diagnosis kit for prevalent beta thalasemia mutations simultaneously and automatically using Real time PCR technique كشور ايران بر روي كمربند تالاسمي قرار گرفته و بتا تالاسمي شايع ترين نوع تالاسمي در آن ميباشد. پراكندگي بيماري در مناطق مختلف كشور يكسان نيست و در حاشيه ي درياي خزر و سواحل خليج فارس و درياي عمان، شايع تر است. ميزان شيوع تالاسمي مينور در استان هاي گيلان، مازندران، خوزستان، بوشهر، هرمزگان، سيستان و بلوچستان و كرمان حدود 10 درصد ، در اصفهان، اطراف زاينده رود و استان فارس 8 الي 10 درصد و در بقيه ي نواحي كشور 8 الي 4 درصد مي باشد. دليل شيوع بالاي بيماري در ايران و در بعضي از اقوام، ازدواج هاي درون گروهي و فاميلي است. تاكنون بيش از 200 جهش بيماري زا در ژن بتا گلوبين شناسايي شده است كه موجب بيماري بتا تالاسمي مي شوند. اين تعداد به استثناي جهش هاي بيماري زايي ست كه در خارج اين ژن( مثلاً نواحي تنظيمي LCR يا ژن هاي كد كننده ي فاكتور هاي رونويسي آن) رخ مي دهند. بيشتر جهش ها از نوع Point Mutation يا جهش هاي تك نوكلئوتيدي و يا حذف(Deletion) و درج شدگي(Insertion) هاي چند نوكلئوتيدي ست و در موارد نادري حذف هاي بزرگ ژني ديده مي شود. نكته ي مهم اين است كه با وجود تنوع جهش ها، در هر جمعيت 4 الي 10 آلل جهش يافته فراواني بيشتري دارند. 4 جهش زير در نواحي مركزي ايران كه شامل استان اصفهان نيز مي شود، بيشترين فراواني را داشته اند: 1- (IVS-II-1 (GtoA) (fer = 28% 2-(Codon 8/9 (+G) (fer = 11.7% 3- (IVS-I-5(GtoC) (fer = 9.3% 4- (IVS-I-110(GtoA) (fer = 5.1% هدف از ادعاي حاضر ساخت يك كيت تشخيصي مي باشد كه توسط آن بتوان به طور همزمان جهش هاي شايع بتا تالاسمي را در بيماران و افراد ناقل توسط منحني ذوب در دستگاه Real time به صورت هوشمند شناسايي نمود. نكته قابل توجه در تكنيك ادعا شده شناسايي انواع جهش ها بطور همزمان و بدون حضور متخصص ژنتيك و بطور هوشمند مي باشد. همانند ساير تشخيص هاي كلينيكي كليه مراحل بطور اتوماتيك و بدون حضور دائمي متخصص انجام و در نهايت توسط متخصص مورد تاييد قرار مي گيرد. نكات متمايز ادعا با روش هاي روتين تشخيصي بكار گرفته در ايران و خارج از كشور به قرار ذيل مي باشد: 1- انجام كليه مراحل و طراحي در داخل كشور و به صورت 100% بومي 2- شناسايي همزمان جهش هاي بيمار بطور همزمان 3- قابليت اجرا توسط دو دستگاه PCR و Real time PCR بسته توانمندي مركز ارائه دهنده 4- حذف مراحل تكميلي و قابليت انجام با حداقل مواد و حداقل زمان 5- كليه مراحل كاملا اتوماتيك و بطور هوشمند بدون حضور دائمي متخصص قابل اجراست 6- كليه مشخصات باليني و پزشكي، از جمله انواع جهش هاي بيمار بصورت اتوماتيك و هوشمند قابل ارائه در يك صفحه پرينت مي باشد