با توجه به افزايش تعداد سويه هاي مختلف جهش يافته ويروس عامل كوويد19 در سراسر جهان از جمله ايران تحقيقات در جهت شناسايي و افتراق موارد ابتلا به ويروس جهش يافته در بيماران، ناقلين و افرادي كه مشكوك به آلودگي به انواع جهش يافته هستند و تست PCR آنها مثبت يا منفي ميشود، با كمك يك كيت توليد داخل هم به لحاظ خودكفايي و هم به لحاظ اقتصادي كمك كننده است. اولين مزيت اين كيت نسبت به كيتهاي ديگر اينست كه نيازي به انجام مرحله استخراج ندارد و با كمك دترجنت نمونه برداري مستقيم در يك بافر ليز حاوي مواد شوينده مانند Triton¬X-100 انجام ميگيرد و نمونه‌هاي ليز شده مي‌توانند بلافاصله تحت آناليز RT-PCR قرار گرفته و در مخلوط اصلي RT-PCR بدون مراحل مياني رقيق شوند. دوم اينكه در اين كيت پروب (همراه مخلوط واكنش) ناحيه ژن اسپايك طراحي و با رنگ فلورسنت نشاندار ميشود و به همراه آغازگرهاي طراحي شده ژن اسپايك براي مناطق جهش يافته در واكنش PCR استفاده ميشوند. پس از آماده سازي مخلوط واكنش بر اساس دستورالعمل كيت، توسط دستگاه ريل تايم، نواحي داراي جهش خاص تكثير يافته و بر اساس ايجاد منحني سيگموئيدي (S شكل) و رنگ حاصل شده در منحني، نتيجه تست ارزيابي و تفسير ميشود. تكثير نواحي هدف نشانه جهش و عدم تكثير نشاندهنده عدم جهش ژن مربوطه است. به عنوان كنترل مثبت از پرايمر اختصاصي نواحي جهش يافته ژن اسپايك و قطعه سنتز شده حاوي اين جهشها استفاده ميشود. دقت، سرعت و در دسترس بودن و توانايي ارتقا به استفاده در تشخيص باليني از ديگر توصيفهاي اين كيت است. همانطور كه قبلا اشاره شد اين كيت قابليت افزودن هر گونه جهش جديد از جمله اميكرون را به صورت پرايمر و پروب اضافي و كانال مربوطه را دارد بنابراين ميتوان در هر زمان بسته به شيوع جهش خاص ويروس كوويد۱۹ آنرا ارتقا داد. MultiplexRT-PCR kit for direct differential detection of N501Y, E484K L542R, SARS-CoV2 virus strains by nanoliposomal extraction method