لیست اختراعات با مالکیت موسسلت تحقيقاتي مركزتحقيقات علوم اعصاب شفا
1 عدد


ثبت :
از
تا
اظهارنامه :
از
تا

بازنشانی
تعداد موارد یافت شده: 1
تاریخ ثبت: 1391/07/04
خلاصه اختراع:

سلول درماني در دنيا امروزه به عنوان يكي از ابزارهاي كارآمد در درمان بيماري هايي كه به نحوي سلول هاي بافت تخريب شده اند يا عملكرد خود را از دست داده اند كاربرد ويژه اي پيدا كرده است. سلول هاي پيوندي، بايد داراي مجموعه اي از ويژگي ها باشد. اولا به آساني به دست آيد. در محيط كشت به راحتي افزايش يابد، از نظر ايمونولوژي خنثي باشد و يا بافت گيرنده آن را پس نزند و توانايي بقاي طولاني مدت و سازگاري در بافت ميزبان را داشته باشد. با توجه به ويژگي ها، به نظر مي رسد BMSCS، گزينه اي مناسب براي تبديل به سلول هاي بنيادي عصبي و پيوند باشد. ديگر اينكه به علت سهولت دسترسي به اين سلول ها، پيوند اتولوگ آنها امكان پذير مي باشد و استفاده از آنها مسائل اخلاقي مربوط به دست آوردن سلول هاي بنيادي عصبي به طور مستقيم از سيستم عصبي و يا استفاده از سلول هاي بنيادي جنيني را به دنبال نداشته باشد. در اين پژوهش سلول هاي مغز استخوان كه همراه با ناخالصي هايي هستند از استخوان فمور و تيبيا رات جدا شد و پس از خالص سازي به وسيله فايكل سلول هاي بنيادين مغز استخوان در محيط كشت DMEM/F12(GIBCO) و سرم نين گاوي 10% FBS به درون يك فلاسك 25 سي سي تخليه در انكوباتور با pH=7.2، دماي 37 درجه سانتي گراد و ميزان 5% CO2 و شرايط مرطوب براي مدت 24 ساعت نگهداري مي شوند و پس از يك روز اين محيط تعويض مي گردد. به هنگام تعويض محيط، سلول ها توسط PBS استريل شسته مي شوند. سپس سلول هاي چسبيده به كف فلاسك به كمك روش آنزيمي، يعني افزودن محلول Accutase از كف فلاسك جدا و پاساژ داده مي شوند و اين كار تا 3 بار پاساژ و هر بار بر اساس پر شدن كف فلاسك ادامه مي يابد. پس از پاساژ سوم سلول هاي استرومايي ظرف كشت بوسيله Accutase جدا شده و در فلاسك 25cm2 در محيط DMEM/F12 غني شده با مواد زير كشت داده مي شود: 20 و 20ng/ml basic fibroblast growth factor و 2%B27 و ng/ml epidermal growth factor. اين مواد و فاكتورهاي رشد براي 3 بار در هفته با محيط عوض مي شود. پس از 7 روز ساختارهاي شبيه نوروسفر تشكيل شده و نوروسفرها پس از جداسازي به وسيله accutase و جداسازي مكانيكي با پيپت پاستور در ظرف كشت حاوي محيط تمايزي كه در آن 5%FBS است ريخته مي شوند. اين سلول ها هم اكنون سلول هاي بنيادين عصبي مي باشند كه با روش هاي ايمنوسيتوشيمي و بررسي آنتي بادي هاي نستين و نوروفيلامنتهاي 68 و 160 كه شاخص سلول هاي بنيادين عصبي است اين امر تاييد شد.

موارد یافت شده: 1