لیست اختراعات حسن كربكندي
اينترفرون بتا واجد تأثيرات گستردهاي از جمله تأثيرات ضد ويروسي، ضد التهابي و ضد توموري بوده لذا به عنوان بك داروي مهم و پركاربرد در درمان بيماريهاي مختلف مانند عفونتهاي ويروسي و MS كاربرد دارد. از اينرو تلاشهاي گستردهاي در جهت افزايش پايداري mRNA، افزايش ميزان ترجمه و بهينهسازي شرايط توليد اين داروي مهم صورت گرفته است. در ضمن اين اختراع تلاش شده است با استفاده از روشهاي مهندسي ژنتيك كانستركت جديدي از ژن اينترفرون بتا با هدف بهبود كيفيت و ميزان توليد دارو توليد گردد. كانستركت مورد نظر حاوي جهش در توالي AREموجود در ناحيهي كد كننده (CRID) بوده كه براي اولين بار در سطح جهان انجام پذيرفته است به طوري كه تغيير الگوي توالي ناپايدار كننده در اين ناحيه سبب القاي پايداري آن ميگردد. تغيير در توالي ARE با استفاده از روش Soeing PCR انجام شد. به منظور مقايسهي بيان و توليد اينترفرون بتا كانستركت حاوي ژن وحشي (فاقد جهش) اينترفرون بتا نيز توليد گرديد. ژن اينترفرون نوتركيب و وحشي در وكتور pSVM- dhfr كلون گرديد. در ادامه ترانسفورماسيون پلازميدهاي pSVM- dhfr حاوي ژن اينترفرون بتا در لاين سلولي CHO-dhfr- با استفاده از كيتLipofectamine صورت پذيرفت. تغييرات ايجاد شده در بيان ژن اينترفرون بتا با استفاده از روش Real Time PCR مورد بررسي قرار گرفت. در نهايت نتايج به دست آمده با استفاده از روش آماري CtΔΔ- 2 مورد تجزيهي آماري قرار گرفت. بررسيهاي نهايي انجام شده نشان داد كه جهش موجود در توالي CRID تأثير چشمگيري را بر روي بيان اينترفرون بتا داشته بهطوري كه سبب افزايش بيان چهار برابري ژن اينترفرون بتا گرديده است. لازم به ذكر است اعمال اين تغييرات و افزايش توليد پروتيئن اينترفرون بتا، با توجه به نقش دارويي و استفادهي روزافزون از اين دارو، تأثير بسزايي در كاهش هزينههاي توليد توسط شركتهاي توليد كنندهي دارو داشته و كاهش هزينههاي توليد، كاهش قيمت نهايي دارو را به همراه دارد. بنابراين نتايج اين تحقيق در بعد اقتصادي نيز حائز اهميت بوده و علاوه بر صرفهجويي اقتصادي براي شركت توليد كننده، تأثير مهمي در كاهش هزينههاي دارو و افزايش رضايتمندي بيماران به همراه دارد.
موارد یافت شده: 1