اختراع حاضر باعنوان " طراحي 6 پرايمر جهت تشخيص RNA ويروس هاري(Rabies virus)توسط تكنيك تك دمايي RT-LAMP در سويه هاي در گردش در ايران " ، شامل 6 پرايمر مي باشد كه در جهت تشخيص RNA ويروس هاري طي تكنيك تك دمايي RT-LAMP به كار مي رود. در مطالعه اي كه در ژاپن براي تشخيص ويروس هاري از طريق اين تكنيك صورت گرفت پرايمر هايي طراحي شدند كه در عمل قادر به اتصال به توالي هدف خود نبودند به همين دليل طي استفاده از آن ها نتيجه مطلوبي حاصل نشد و برآن شديم تا پرايمر هاي كارآمدي را طراحي نماييم. طراحي پرايمر ها از طريق نرم افزار LAMP Primer designing soft ware primer explorer V3 بر اساس توالي نوكلئوتيدي ويروس هاري با شماره توالي NC_001542.1 در سايت NCBI انجام گرفت. براي طراحي پرايمرهاي LAMP بايد وارد سايت Eiken شده و به صورت برخط، طراحي پرايمر انجام مي گيرد. در اين پروژه، از نسخه V5 براي طراحي پرايمر استفاده گرديد. در آغاز طراحي پرايمرها، نرم افزار به صورت اتوماتيك درصد GC را محاسبه مي كند و همان طور كه اشاره شد سكانس هدف بايد بين 2000-500 جفت باز باشد و دقت شود كه از اين حدود خارج نشود. در نهايت 6 پرايمر شامل 2 پرايمر خارجي، 2 پرايمر لوپ و 2 پرايمر داخلي براساس ژن N طراحي شدند كه قادر بودند با اختصاصيت بالايي به توالي هدف خود متصل شوند.

زمينه فني اختراع: اين اختراع مربوط مي شود به تهيه نانوذره نقره با استفاده از عصاره گياه اكاليپتوس به عنوان عامل احياء كننده و استفاده از اين نانوذره به عنوان ادجوانت در فرمولاسيون واكسن دامي هاري.  شرح مختصر بيماري هاري يك انسفالوميليت حاد ويروسي است كه غير قابل درمان بوده و در صورت ابتلاء، كشندگي آن حتمي مي باشد. براساس برآوردهاي رسمي سالانه بيش از 60000 نفر از هاري مي ميرند كه 95% آن در آسيا و آفريقا رخ مي دهد. هاري يك بيماري قابل پيشگيري بوده و يكي از اصلي ترين راهكارهاي كنترل بيماري هاري واكسيناسيون مي باشد. از گذشته براي بهبود تاثير واكسن در مقابله با عفونت ها استفاده از ادجوانت ها ضروري بوده هست. يكي از پركاربردترين ادجوانت ها، هيدروكسيد آلومينيوم (آلوم) است كه در ايالات متحده تركيبات آلوم به صورت گسترده در توليد واكسن ها مورد استفاده قرار مي گيرد و در حال حاضر از اين ادجوانت در توليد واكسن هاري دامي استفاده مي شود. پيشرفت هاي اخير در زمينه نانوبيوتكنولوژي به ويژه توليد نانوذره هاي فلزي با اندازه و شكل خاص، منجر به توسعه عوامل گوناگون با كاربردهاي مختلف شده است. يكي از ويژگي هاي نانوذرات توانايي به دام انداختن يا جذب مولكولهايي مانند نوكلئيك اسيدها و پروتئين ها هستند، از اين رو سيستم واكسيناسيون بر پايه نانوذرات باعث ايجاد فرصت هايي براي كنترل تحويل آنتي ژن به سلول هاي ايمني مورد نظر شده است. با توجه به اثرات بالقوه ادجوانتي نانوذرات نقره و همچنين سنتز آسان اين نانوذرات با استفاده از عصاره گياهي اكاليپتوس در اين مطالعه توانايي نانوذرات نقره در افزايش پاسخ هاي ايمني به عنوان ادجوانت عليه واكسن هاري دامي بررسي شد.  كاربردها: با توجه به اثرات ادجوانيسيته نانوذره نقره، از اين نانوذره مي توان در صنعت واكسن سازي به عنوان ادجوانت استفاده نمود.  مزيت ها: 1- سنتز آسان و ارزان 2- عوارض جانبي بسيار كم 3- تحت كنترل بودن سنتز نانوذره نقره از نظر اندازه 4- انواع انواع تغييرات دلخواه و مورد نياز بر روي نانوذره نقره

در حال حاضر از هيدروكسيد آلومينيوم (آلوم) در توليد واكسن هاري دامي استفاده مي شود. واكسن هاي بر پايه آلوم در القا پاسخ هاي ضد ويروسي موثر نيستند. از اينرو ادجوانت هاي جديد جهت افزايش ايمونوژنيسيته آنتي ژن هاي ضعيف به خصوص آنتي ژن هاي ويروسي، القاء حداقلي اثرات جانبي، تحريك طولاني مدت پاسخ هاي ايمني نياز است. با توجه به توانايي نانودندريمرها در به دام انداختن يا جذب مولكولهايي مانند نوكلئيك اسيدها و پروتئين ها، سيستم واكسيناسيون بر پايه نانودندريمر باعث ايجاد فرصت هايي براي كنترل تحويل آنتي ژن به سلول هاي ايمني مورد نظر شده است. با توجه به سنتز آسان اين نانودندريمرها ، در اين اختراع نانودندريمر نسل 2 ساخته شده بر پايه اسيد سيتريك در فرمولاسيون واكسن هاري دامي مورد استفاده قرار گرفتند و توانايي آن در افزايش پاسخ هاي ايمني به عنوان ادجوانت عليه واكسن هاري دامي نشان داده شد.

اختراع حاضر تحت عنوان " طراحي2 پرايمرجديد جهت تشخيص RNA ويروس هاري(Rabies virus)توسط تكنيكReal Time PCR در سويه هاي در گردش در ايران" مي باشد. و شامل پرايمر هايي از جنس اسيد نوكلئيك است كه ويژه DNAپليمراز ويروس هاري با شماره توالي NC_001542.1:7170-7489 Rabies virus, complete genome براي شناسايي ژن L (نوكلئوكپسيد) در اين ويروس طراحي شده اند.