آنزيم ليپاز از گونه سايكروباكتر c18 را از طريق پلاسميد pet 28 كه حاوي ژن آنزيم ليپاز است، وارد سلول مستعد BL21 شد و القا و بيان آنزيم ليپاز با غلظت 5/0 ميلي مولار IPTG صورت گرفت. سپس از طريق ستون تخليص نيكل –آگارز پروتئين به يون نيكل از طريق دنباله پلي هيستيدين متصل شد و كيفيت تخليص آنزيم و اندازه مولكولي آن از طريق SDS PAGE موردبررسي قرار گرفت؛ و براي اولين بار آنزيم ليپاز روي بستر كيتوسان – زينك اكسيد به روش جذب فيزيكي و پيوند كووالانسي تثبيت شد. براي انجام فرآيند تثبيت بستر نانو هيبريدي كيتوسان –زينك اكسيد سنتز شد و با كمك طيف‌سنجي پراش انرژي پرتوايكس (EDX) از كراس لينك بين دو نانوذره اطمينان حاصل شد، روي بستر سنتزي فرآيند تثبيت فيزيكي و كووالانسي آنزيم ليپاز انجام گرفت. نتايج تثبيت آنزيم ليپاز نشان داد كه آنزيم كارايي كاتاليتيكي خود را در تثبيت فيزيكي و كووالانسي به ترتيب در حدود 90 و 96 درصد حفظ كرده است درعين‌حال پايداري آنزيم افزايش‌يافته است براي مثال نيمه‌عمر آنزيم در دماي 35 درجه نشان داد كه در تثبيت فيزيكي 7% و در تثبيت كووالانسي 15 درصد نيمه‌عمر افزايش داشته است. درعين‌حال دلتاجي استار هم در تثبيت افزايش‌يافته است كه اين نشان مي‌دهد بايد انرژي بيشتري صرف كنيم تا آنزيم دچار دناچوراسيون شود و باعث از دست رفتن فعاليت آنزيم شود. پايداري ذخيره‌اي تثبيت فيزيكي آنزيم در دماي 25 درجه پس از گذشت 35 روز در مقايسه باحالت محلول 200 درصد افزايش داشته است و در تثبيت كووالانسي 320 درصد افزايش داشته است. آنزيم در تثبيت فيزيكي و كووالانسي تا سيكل دهم بيش از 50% فعاليت داشته است و در سيكل هشتم بيش از 80 در صد فعاليت خود را حفظ مي‌كند و اين نكته‌ي حائز اهميتي است زيرا در مصارف صنعتي باعث صرفه‌جويي مي‌شود. تثبيت كووالانسي و فيزيكي در برابر افزايش غلظت نمك‌ها به‌خوبي توانسته مقاومت كند و اثر محافظتي داشته باشد براي مثال نمك KCl با افزايش غلظت در تثبيت كووالانسي تا 180% توانسته فعاليت داشته باشد. هم‌چنين آنزيم توانسته در برابر حلال‌هاي، دترجنت و شلاتور نقش محافظتي داشته باشد. Designing and production of stabilized recombinant lipase enzyme from Psychrobacter sp. C18 on Synthesized nanocomposite chitosan-zinc oxide with high stability for use in industrial applications