در اين اختراع از يك واكنش سه جزيي استفاده شد. ابتدا از تركيب عناصر نمك N-1- نفتيل اتيلن دي آمين دي هيدروكلريد و سولفانيليك اسيد جهت تهيه يك تركيب شيميايي استفاده گرديد. تركيب به دست آمده كه نوعي معرف گريس اصلاح شده است، بر روي يك بستر متخاخل سلولزي نشانده شد. پس از تثبيت معرف فوق بر روي بستر، واكنش پذيري آن با يون هاي نيترات بررسي شد. پس از بهينه كردن تمام پارامترها، يك منحني كاليبراسيون مرتبط با رنگ كه رنگ هاي مشخص تشكيل شده بر روي بستر تهيه شده را به غلظت هاي مختلف يون نيترات مربوط مي كند، تهيه شد.

- خلاصه‌اي از توصيف اختراع؛ اهداف اختراع عبارتند از: ساخت ريزمحيط خارج سلولي زيست سازگار، برپايه بستر گرافني كه توسط پپتيد مقلد-زيستي فعال شده كه براي تمايز هدفمند سلولهاي بنيادي به سلوهاي شبه كبدي مناسب باشد. اين پپتيدهاي فعال از طريق مطالعات داكينگ انتخاب و واكنش تثبيت كووالانسي پپتيد فعال بر روي بستر گرافني كربوكسيله در محيط آبدوست (غير خشن) انجام شده است. ضمن آنكه مقايسه ماركرهاي بلوغ يافتگي به ماركرهاي جنيني سلولهاي شبه كبدي از ديگر اهداف اين اختراع است. در اين اختراع با هدف الگو برداري از ماتريكس خارج سلولي بافت كبد، پپتيد هاي مقلد زيستي كه بيشترين ميل تركيبي با رسپتورهاي هپاران سولفات سطح سول را داشتند انتخاب و بر روي داربست هاي گرافني تثبيت كرده. سپس زيست سازگاري اين داربست هاي فعال شده بررسي و نشان داده شد كه اين بسترهاي طراحي شده علاوه بر اينكه زيست گار بوده در غلظت هاي خاص پپتيد تثبيت شده باعث افزايش رشد سلول مي شود. سپس توانايي اين بسترها در تمايزسلول هاي كبدي بررسي شد كه با بررسي فاكتورهاي مولكولي كبدي نشان داده شد كه سلول هاي كشت داده بر روي اين بستر ها توان تمايزي بالاتري نسبت به گروه كنترل (كشت داده شده بر روي ظرف كشت) داشتند.

خلاصه‌اي از توصيف اختراع؛ معرفي و به كار گيري مواد سرما محافظ مختلف، به منظور ممانعت از تشكيل كريستال هاي يخ داخل و خارج سلولي، شوك اسمزي و اثر محلول، از جمله تلاش هايي است كه در راستاي بهينه سازي فرايند انجماد شيشه اي، به آن مبادرت مي ورزند. بارز ترين ثمره ي تلاش هايي از اين دست، نرخ زنده ماني بسيار بالاي رويان هاي منجمد- ذوب شده ي حاصل از تكنيك هاي كمك باروري است كه امروزه شاهد آن هستيم. علي رغم تمام پيشرفت هاي صورت گرفته در زمينه ي بهبود روند انجماد شيشه اي، هم چنان نمي توان به كيفيت رويا هان منجمد ذوب شده اطمينان كامل داشت؛ چرا كه سنجش كيفي تنها مشروط به بررسي ويژگي هاي ماكروسكوپي و مورفولوژيكي رويان نيست. چنانچه از نقطه نظر ميكروسكوپي و با ديد مولكولي به مبحث انجماد شيشه اي بنگريم، به اين امر پي مي بريم كه تغييرات شديد و ناگهاني دما يكي از مهم ترين فاكتور هاي آسيب رساني است كه رويان حين فرايند انجماد و ذوب با آن مواجه است. شوك حرارتي نه تنها به طور مستقيم، افزايش سطح بيان خانواده ي ژني پروتئين هاي شوك حرارتي (HSPs) را به دنبال دارد بلكه به طور غير مستقيم، منجر به اختلال در عملكرد ميتوكندري و بروز استرس اكسيداتيو و آپوپتوز مي گردد. بنابراين، صرف مهيا كردن شرايط اوليه جهت انجماد مستقيم رويان، كافي نيست. يك فرايند انجماد ايده آل علاوه بر دارا بودن مواد سرمامحافظ مناسب، مستلزم فراهم نمودن نرخ بالاي سرد شدن و گرم شدن است؛ به نحوي كه عبور هر چه سريع تر رويان از ناحيه ي خطر دمايي را تضمين نموده و قادر به پيشگيري از شوك دمايي باشد. بدين منظور در اين اختراع با در نظر گرفتن اولويت هاي پيش رو در جهت بهينه سازي فرايند انجماد شيشه اي از گرافن اكسايد كه نانو ذره اي داراي خاصيت هدايت حرارتي منحصر به فرد و هم چنين وزن مولكولي بالا است به عنوان ماده ي سرما محافظ نفوذ ناپذير جديد استفاده شد و تاثير آن بر ميزان زنده ماني و سطح بيان ژن هاي دخيل در استرس هاي سلولي مورد ارزيابي قرار گرفت.

ما با استفاده از تكنولوژي CRISPR (CRISPR / Cas9) موفق به توليد دو نوع موش (كريسمس) متفاوت با كمبود فاكتور VIII انعقادي (FVIII) در موش NMRI موش شديم. كار ما در سه مرحله مجزا انجام شد: (1) طراحي و ساخت سازه هاي ژني، هدف قرار دادن يك منطقه در Exon 3 از جنس FVIII موش، (2) تزريق ساخت ژن به زژيوت موش NMRI و انتقال آن در رحم، و (3) تجزيه و تحليل موش متولد شده است. موش هاي بنيانگذار توسط توالي DNA ژنومي در محل هدف ژن FVIII مورد بررسي قرار گرفت كه اختلالات فريم هاي خواندن ژن FVIII را در دو مورد مختلف نشان داد. جفتگيري موشهاي بنيانگذار با نوع وحشي منجر به كسب موشهاي جهش يافته بود. تجزيه و تحليل DNA ژنوم نشان داد كه حذف ژن 22 جفت بازي در ژن فاكتور VIII در ردۀ موشي اول و يك درج 23 جفت بازي در ژن فاكتور VIII در ردۀ ديگر اتفاق افتاده است. تجزيه و تحليل توالي cDNA از موش ردۀ اول تحمل حذف 22 جفت بازي تاييد نمود. علاوه بر اين، آزمايش انعقاد روي سرم موش با استفاده از يك كيت انعقادي نشان داد كه مقدار FVIII فعال در موش هاي جهش يافته به طور قابل توجهي پايين تر از ميزان سالم بود كه تأثير جهش در ژن FVIII موش و نسل هاي موش هاي هموفيلي. در حال حاضر در پژوهشگاه ملي مهندسي ژنتيك و زيست فناوري، در مركز موش هاي ترانس ژنيك، امكان توليد نسل هاي متوالي از هر دو ردۀ موش هاي هموفيلي فراهم شده است و پايداري نقص هموفيلي A در فرزندان نسل ها به طور پيوسته از نظر ويژگي هاي ژنوتيپ و فنوتيپ به اثبات رسيده است. CRISPR/Cas9

خلاصه: در اين اختراع اثر بسترهاي گرافني بر تكوين و كيفيت رويان موش در مراحل پيش از لانه¬گزيني مورد بررسي گرفت. از نانوذرات گرافن بسترهاي مناسب براي كشت سلول و همچنين كشت جنين تهيه گرديد و با تغيير سطحي فيلم هاي گرافن زيست سازگاري اين بستر بهبود يافت. بستر معرفي شده در اين اختراع با توجه به خصوصيات فيزيكوشيمياي سطح آن براي كشت و تكوين جنين در شرايط آزمايشگاهي مناسب مي باشد چونكه جنين در شرايط طبيعي

دستگاه PCS1080D در واقع يك منبع جريان بوده كه جريان را به صورت پالسي به نمونه تحت تست اعمال مي كند. اين دستگاه يك مبدل توان بوده (Power converter) و وظيفه آن تبديل نوع منبع انرژي ورودي از منبع ولتاژ AC (سينوسي 50Hz) به منبع جريان پالسي با فركانس متغير مي باشد. فرايند پردازش توان در اين دستگاه در سه مرحله انجام مي گردد. اين سه مرحله به قرار زير مي باشند. 1. تبديل ولتاژ ورودي AC (سينوسي 50Hz) به ولتاژ DC (يكسو شده) معدل بدون تغيير در سطح ولتاز (Rectifier Unit:RU) 2. تبديل ولتاژ DC به جريان DC با دامنه مورد نظر كاربر (Current Buck Unit:CBU) 3. تبديل جريان DC به جريان پالسي و اعمال به نمونه (Current Chopper Unit:CCU)