گروه A روتاويروس بيشترين عامل مهم گاستروانتريت ويروسي در انسان در جهان است و مسئول مرگ حدود 600 تا 870 هزار كودك در سال مي¬باشد. از آنجا كه اسهال نوزادان يكي از مسائل مهم بهداشتي است، بنابراين تشخيص و درمان اين بيماري از اهميت ويژه¬اي برخوردار است. تصور بر اين است كه تغيير آنتي ژنيك شيفت، دريفت و بازآرايي ژنومي درون يك قطعه، مكانيسم¬هاي تكاملي روتاويروس باشند. تكثير متوالي ويروس با MOI بالا در كشت سلول و همچنين عفونت¬هاي مزمن در گروه¬هاي هدف با نقص ايمني، در تكامل آن نقش دارد. با در نظر گرفتن تحقق موفقيت مطالعات روتاويروس و اهميت زياد توسعه واكسن¬هاي روتاويروسي، جمع آوري داده و توسعه تست¬هاي خط اول مورد استفاده براي تشخيص روتاويروس¬ها براي فهم بهتر ويژگي¬هاي آنتي ژنيك و مولكولي ويروس لازم است. اين مطالعات اهميت تنوع ژنتيكي را نشان داده و مي¬توانند اطلاعات ارزشمندي در زمينه تكثير، تنوع، بيولوژي و تكامل روتاويروس فراهم كند. از آنجا كه مطالعات قطعات بازآرايي شده براي تشخيص توالي¬هاي ضروري براي تكثير و بسته بندي مفيد است، هدف از انجام مطالعه¬ي حاضر بررسي توانايي روشPoly (A) -Tailed Universal Reverse Transcription PCR (Poly(A)-RT-PCR) در تشخيص قطعات استاندارد و بازآرايي شده است. با اين هدف، راندمان تكثير با اين روش، براي تكثير سويه¬ي RF از روتاويروس گاوي بررسي شد. ما توانايي روش Poly(A)-RT-PCR پس از PAGE و رنگ آميزي نيترات نقره را براي رديابي ويژه دو قطعه¬ي بازآرايي شده ارزيابي نموديم. براي استفاده از اين روش روتاويروس روي رده¬ي سلولي MA-104متراكم تك لايه¬اي با MOI يك كشت داده شد و هر پاساژ براي بررسي بيشتر پروفايل¬هاي ژنومي توسط ژل پلي آكريل آميد 10 درصد (به مدت 16 ساعت با ولتاژ 200) به مقاديرمورد استفاده تقسيم و فريز شد. ژنوم RNA دو رشته¬اي استخراج و دم پلي آ در انتهاي 3^' ژنوم هدف تك رشته¬اي به آن افزوده شد. RNA استخراج شده ابتدا توسط دم پلي آ اصلاح و سپسRNAي برچسب دار براي تكثير و رديابي قطعات استاندارد و بازآرايي شده روتاويروس سويه¬يRF استاندارد و بازآرايي شده با استفاده از RT-PCR استفاده شد. cDNA توسط آغازگر طراحي شده از zebra fish و بدون استفاده از آغازگرهاي از قبل طراحي شده و يا تصادفي براي ژن¬هاي خاص، توليد شد. به منظور تاييد امكان اين رهيافت، RT-PCR با آغازگرهاي اختصاصي و ژنوم اصلاح نشده نيزانجام شد. نتايج، بازآرايي ژن از طريق پاساژهاي سريالي روتاويروس را نشان داد، كه طي آن ژن¬هاي NSP1وNSP3 با الگوي مهاجرت متفاوت در الكتروفورز ژل پلي آكريل آميد و در زمينه¬اي ازهمتاهاي استاندارد مشاهده شدند. بر خلاف قطعات استاندارد تكثير ضعيف قطعات بازآرايي شده بيش از همتايان استاندارد خود نشان داده شد، كه شايد به دليل توالي كوتاه در قطعات استاندارد باشد. نتايج تاكيد مي¬كند كه RT-PCR نسبت به انواع بازآرايي شده تمايل به تكثير الگوهاي كوتاه دارد و نمي¬تواند براي رديابي توالي¬هاي بازآرايي شده در زمينه¬اي ازتوالي¬هاي همولوگ استاندارد استفاده شود، بنابراين Poly(A)-RT-PCR توسعه يافت. در اين مطالعه يك دستورالعمل جديد براي توليد cDNA با طول كامل از RNA¬هاي غير آدنيله (بدون دم پلي آ) براي روتاويروس معرفي شده است. به عنوان نتيجه، تركيب تكنيك PCR و در مورد روتاويروس RT-PCR با روش تغيير و اصلاح ابتدايي پلي آدنيلاسيون ژنومي مي¬تواند به عنوان روشي انتخابي براي تشخيص و بررسي تغييرات مولكولي از جمله بازآريي ژنومي و نيز توالي¬هاي ناشناخته در ساير ويروس¬ها به كار رود و ، بدون اغراق مي¬توان اساس رويكرد منطبق بر اين روش را به عنوان آسان¬ترين مسير تكثير هر گونه توالي مجهول دانست.

سابقاً از كوركومين خالص براي درمان بيماري ام اس استفاده مي شد كه بدليل پايداري زيستي كم در بدن و دفع سريع از طريق كليه ها، مصرف مقادير بسيار زياد كوركومين با هدف دستيابي به آثار درماني مطلوب آن موجب سميت كبدي، ايجاد عوارض جانبي نامطلوب و عدم استحصال نتيجه مطلوب مي شد. اختراع حاضر شامل سنتز و استفاده از حاملهاي پليمري غير يوني زيست سازگار و زيست تخريب پذير بر پايه اسيد چرب اولئيك براي ساخت داروي نانوكوركومين با هدف افزايش حلاليت و ماندگاري زيستي كوركومين به عنوان داروي ضد ام اس مي باشد. نانوحامل پليمري، يكي از مجموعه حامل هاي سنتز شده توسط تني چند از مخترعين همين اختراع مي باشد كه بوسيله مواد اوليه اسيد چرب اولئيك و گريد پلي اتيلن گليكول 400 سنتز شده است. اين نانوحامل علاوه بر زيست سازگار بودن، قادر است ماده موثره كوركومين را براي مدت 18 ماه در محيط آبي بافر فسفات در ابعاد 20 تا 80 نانو متر پايدار نمايد. اين امر باعث افزايش حلاليت ماده كوركومين شده و اثر بخشي آن را به عنوان يك داروي ضد ام اس بيشترمي كند. در مطالعه ما، استفاده از داروي نانوكوركومين با دوز مشخص شده، باعث درمان رت هاي مدل بيماري ام اس با دوزبسيار كمتر و اثربخشي بسيار بيشتر دارو نسبت به كوركومين خالص شد. همچنين امكان فرمولاسيون هاي مختلف اشكال دارويي بدليل تنوع محصولات اين نانوحامل از شكل روغني تا نيمه جامد و محلول در آب وجود دارد. اين حامل هاي پليمر سنتز شده مي توانند براي كاربردهاي فرمولاسيون اشكال مختلف دارويي از جمله: ساخت محلولهاي تزريقي، كپسول ژلاتين نرم، مواد دارويي نيمه جامد براي شياف حاوي ماده موثره نانوكوركومين و ساخت كپسول هاي سخت از مواد پودري حاوي نانوكوركومين استفاده شوند. فرم كپسول خوراكي اين دارو هم اكنون توليد شده و از آنجا كه همگي اجزاي اين نانو دارو قابل تهيه بصورت بومي در داخل كشور مي باشد، لذا كاربرد آن بعنوان درمان مؤثر بيماري هاي صعب العلاج نورودژنراتيو نظير ام اس كاملاً مقرون به صرفه مي باشد.

سرطان ريه يكي از همه گيرترين سرطان‌ها و مهمترين علل مرگ در سراسر جهان است .استعمال سيگار اصلي ترين ريسك فاكتور است اما عوامل عصبي و فشار هاي محيطي و حرفه ايي هم به گسترش سرطان ريه ارتباط دارند. مطالعات نشان داد كه اختلال در مسير دوپامينرژيك در ايجاد ريسك سرطان سلول هاي ريه نقش بسزايي دارد. سيستم دوپامينرژيك شامل گيرنده هاي دوپاميني است در سيستم اعصاب مركزي بيان مي گردند و بطور طبيعي با ليگاند دوپامين تحريك مي شوند. مطالعه حاضر نشان داد كه پروفايل بيان ژن‌هاي گيرنده هاي دوپاميني در افراد مبتلا به بيماري سرطان ريه در مقايسه با افراد سالم متفاوت است و به نظر مي رسد اين پرو فايل پس از ابتلاي فرد به بيماري تغيير كرده است. واحتمالا در صورت درمان قطعي و بهبود علايم كلينيكي به حالت اول در شرايط سلامت برمي‌گردد. بنابرنتايج بدست آمده، مخترعين با اثر دهي يك آگونيست اختصاصي گيرنده درگير در سرطان ريه به نام بروموكريپتين در يك رده سلولي از آدنوكارسينوماي ريه كه طبق نتايج آماري شرح حال بيماران شايعترين نوع بيماري مي باشد، موفق به القاي آپوپتوز سلولي قابل توجهي در اين سلول هاشدند. نتايج نشان دادند كه بروموكريپتين در يك روش وابسته به مدت زمان تيمار و دوز ، تكثير سلول هاي سرطاني ريه را مهار مي كند و در دوز موثر دارو بيان ژن هاي گيرنده نوع 2 دوپامين به نحو مناسبي افزايش مي يابد . در مرحله ي نهايي براي اثر دهي بصورت هدفمند از طريق گيرنده ي اختصاصي و افزايش ميزان نفوذ دارو طراحي وساخت نانوسامانه ي ليپوزومي انجام شد كه به طور قابل توجهي بصورت هدفمند با رهايش مناسب دارو موجب بروز حدود 50 درصد آپوپتوز در سلول هاي سرطاني ريه گرديد .

در اختراع پيشين از كاتاليست سمي قلع براي استريفيكاسيون استفاده شده بود كه محصول نهايي نياز به خالص سازي داشت و رنگ محصول هم 5 گاردنر بود. هم چنين از گريدهاي پلي اتيلن گليكول استفاده مي شد كه امكان تشكيل ناخالصي هاي تري بلاك وجود داشت و خالص سازي محصول مستلزم صرف وقت و انرژي بود. زمان واكنش براي پايلوت 4 كيلويي 6 ساعت و پايداري نانوكوركومين هم حداكثر تا يك سال بود. اختراع حاضر شامل سنتز و استفاده از حاملهاي پليمري غير يوني زيست سازگار و زيست تخريب پذير بر پايه اسيد چرب اولئيك براي افزايش حلاليت كوركومين به عنوان داروي ضد سرطان مي باشد و علاوه بر زيست سازگار بودن، قادر است ماده موثره كوركومين را براي مدت 18 ماه در محيط آبي بافر فسفات در ابعاد 20 تا 80 نانو متر پايدار نمايد. اين امر باعث افزايش حلاليت ماده كوركومين شده و اثر بخشي آن را به عنوان يك داروي ضدسرطان مي گردد. حامل هاي پليمري بوسيله مواد اوليه اسيد چرب اولئيك و گريدهاي مختلف پلي اتيلن گليكول يا متوكسي پلي اتيلن گليكول 200، 400، 600، 1000، 1500، 2000، 4000، 6000 و 8000 با ساختار شيميايي دي بلاك سنتز شده است. استفاده از متوكسي پلي اتيلن گليكول در 9 گريد جديد امكان تشكيل ناخالصي تري بلاك را به صفر مي رساند و باعث افزايش پايداري ذرات نانو كوركومين تا 18 ماه مي گردد. اين روش استفاده از جو ازت براي خروج آب حاصل از واكنش مي باشد و از هيچ كاتاليستي براي استريفيكاسيون استفاده نشده است لذا احتياجي به استفاده از كاتاليست هاي سمي خالص سازي ماده نهايي نمي باشد و رنگ محصول نهايي را تا 1 گاردنر كاهش مي دهد. عدد اسيدي ميسل هاي پليمري سنتز شده در محدوده mg KOH/g 8 قرار دارد كه معيار اتمام سنتز حاملهاي پليمري رسيدن به اين عدد اسيدي مي باشد. همچنين امكان فرمولاسيون هاي مختلف اشكال دارويي بدليل تنوع محصولات اين اختراع از شكل روغني تا نيمه جامد و محلول در آب وجود دارد. حامل هاي پليمر سنتز شده در اين اختراع مي تواند براي كاربردهاي فرمولاسيون اشكال مختلف دارويي از جمله: ساخت محلولهاي تزريقي، كپسول ژلاتين نرم، مواد دارويي نيمه جامد براي شياف حاوي ماده موثره نانوكوركومين و ساخت كپسول هاي سخت از مواد پودري حاوي نانوكوركومين استفاده شود.

با استفاده از اين روش مي توان از تمايز سلول هاي بنيادي مختلف (جنيني، بالغ و iPS) سلول هاي تمايزيافته خالص به دست آورد. با اين كار نه تنها مي توان يكي از معضلات اصلي در استفاده از سلول درماني جهت درمان بسياري از بيماري ها (از قبيل ديابت نوع1) را حل كرد؛ بلكه با به دست آوردن سلول هاي تمايزيافته خالص مي توانيم مطالعات دقيقتري را در زمينه بررسي بيان ژنها در ضمن تمايز و پس از تمايز انجام دهيم. با توجه به اينكه پس از تمايز سلول هاي بنيادي، بسياري از سلول ها به صورت تمايزنيافته باقي مي مانند؛ اولا اين سلول هاي تمايزنيافته مي توانند باعث بروز سرطان در افرادي شوند كه در نهايت سلول هاي ذكر شده به آنها پيوند زده مي شود، ثانيا اين سلول هاي تمايزنيافته در انجام مطالعات (از قبيل مقايسه بيان ژنها بين سلول هاي بنيادي و تمايزنيافته) خلل ايجاد مي كنند. با استفاه از نانوحامل ب بلاك-كوركومين ما توانستيم از تمايز سلول هاي بنيادي، سلول هاي خالص تمايز يافته توليد كنيم. اين سلول ها را مي توان براي مراحل بعدي (از جمله مطالعات دقيق تر مربوط به بيان ژنها) استفاده كرد.

كوركومين، يك داروي پلي فنلي طبيعي است كه از گياه زردچوبه بدست مي آيد. مطالعات مختلف اثرات آنتي اكسيدان، ضد ويروسي، ضد سرطان و ... كوركومين را نشان داده است. حلاليت آبي كم و دسترسي زيستي پايين كوركومين مشكلات عمده در استفاده از آن مي باشد. در اين اختراع براي غلبه بر مشكلات كوركومين ابتدا دندريمر زيست سازگار و زيست تخريب پذير پلي اتيلن گليكول-سيترات نسل دو (G2)، با چند روش جديد و استفاده از شيمي سبز سنتز شد. سپس روش هاي مختلفي براي اتصال مستقيم كوركومين به دندريمرG2 بررسي شد و در نهايت براي اولين بار در دنيا كوركومين بصورت مستقيم و بدون استفاده از لينكر به دندريمر G2 پلي اتيلن گليكول-سيترات كانژوگه گرديد و تاييد و تعيين ساختمان و اندازه محصولات سنتز شده توسط روش هاي مختلف انجام گرديد. همچنين براي اولين بار در دنيا از نانو كوركومين حاصل جهت مهار ويروس HIV-1 استفاده شد. كانژوگه كوركومين-دندريمر سنتز شده در اين اختراع حلاليت آبي فوق العاده بالايي داشت و با توجه به مطالعات فلوسايتومتري و ميكروسكوپ فلورسنت نفوذ پذيري آن به سلول حدود 80% افزايش يافته علاوه كانژوگه كوركومين-دندريمر تا 92% تكثير ويروس HIV-1 را مهار كرد. بنابراين كانژوگه كوركومين-دندريمر سنتز شده در اين اختراع مي تواند يك داروي بسيار موثر بر ضد ويروس HIV-1 باشد.