ويروس آنفلوانزا متعلق به خانواده ارتوميكسوويريده بوده و شامل سه تيپ A، B وC هست. بيماري آنفلوانزا در انسان بيشتر توسط تيپ A و كمتر به وسيله تيپ B ايجاد مي شود و سالانه تعداد زيادي از افراد در تمامي مناطق جغرافيايي دنيا به آن مبتلا مي شوند. با توجه به اينكه برخي باكتري ها نيز ممكن است علائم مشابه بيماري آنفلوانزا را ايجاد كنند، لذا تشخيص صحيح و سريع بيماري در كاهش مصرف نادرست آنتي بيوتيك ها و مصرف صحيح داروهاي ضدويروسي، بسيار با ارزش مي باشد. يكي از كارآمدترين روش هاي به منظور تشخيص بيماري استفاده از روش هاي مولكولي است. رخداد جهش هاي ژنتيكي در طول زمان، در ژن هاي ويروس آنفلوانزا زياد بوده و اين امر منجر به ناكارآمدي بسياري از پرايمر و پروب هايي تشخيصي ويروس كه در گذشته طراحي شده، گرديده است و همچنين طراحي پرايمر و پروب هاي اختصاصي جديد را نيز مشكل مي نمايد. در سال هاي گذشته مصرف بي رويه دارو هاي ضد ويروسي در طب انساني و واكسيناسيون ناموفق در دامپزشكي، منجر به بروز جهش و مقاومت در برخي از سويه هاي ويروس آنفلوانزا گرديده است. بنابراين در حال حاضر توصيه مي شود، به منظور جلوگيري از بروز جهش هاي ژنتيكي بيشتر، پيش از تجويز دارو و واكسيناسيون، ابتدا ويروس در نمونه هاي باليني با روش هاي مولكولي موجود مانند Real time PCR حتمأ تشخيص داده شود. برخي از مزاياي استفاده از اين روش شامل حساسيت و ويژگي بالا، سرعت بالاي رسيدن به نتيجه ، قابليت اندازه گيري تعداد ماده ژنتيكي ويروس در حجم مشخصي از نمونه آن مي باشد. افزون بر اين، Real-Time PCR مي تواند براي تعداد زيادي نمونه مورد استفاده قرار گيرد. از اين رو طراحي و به كارگيري اين روش به منظور تشخيص دقيق و به موقع در بيماران مشكوك به عفونت آنفلوانزايي و بومي سازي اين فن آوري ضروري است. شناسايي قطعه ژني مناسب بر اساس ژن M ويروس هاي آنفلوانزاي تيپ A به منظور طراحي پرايمر ها و پروب اختصاصي، طراحي پرايمرها و پروب اختصاصي ويروس هاي آنفلوانزاي تيپ A، راه اندازي روش rt-Real-Time PCR به منظور شناسايي ويروس در نمونه هاي باليني، تعيين حساسيت و ويژگي باليني و آزمايشگاهي تست طراحي شده از اهداف بدست آمده در اين روش نوين تشخيص باليني مي باشد. از مزاياي اين اختراع مي توان شناسايي ويروس آنفلوانزاي تيپ A در نمونه هاي باليني با حساسيت و ويژگي بالا به صورت كمي و كيفي و بومي سازي آن، هموارشدن ساخت انواع كيت هاي تشخيصي Real-Time PCR آنفلوانزا در كشور بصورت توليد انبوه و صرفه جويي ارزي قابل توجه، شناسايي دقيق و سريع بيماري آنفلوانزا در زمان پاندمي هاي احتمالي در داخل كشور را بر شمرد.

هليكوباكترپيلوري گونه‌اي از باكتري هليكوباكتر بوده و شايع‌ترين موجود ذره ‌بيني است كه انسان‌ها را در بعد جهاني مبتلا به عفونت ساخته است . بيش از نيمي از مردم دنيا آلوده به اين باكتري هستند . باكتري مذكور عامل اصلي بيماريي‌هايي مثل زخم معده و ناراحتي‌هاي معده و ابتداي روده محسوب مي‌شود . آمار مبتلايان به اين ميكروب در كشورهاي جهان سوم و ايران درصد بسيار بالاتري دارد (حدود 74 درصد از جمعيت بالاي سي و پنج سال در ايران). هليكوباكتر پيلوري اصولاً باكتري مارپيچي مي‌باشد ، اما مي‌تواند به شكل كروي هم تغيير شكل پيدا كند كه اين شكل هم قابل زيست نو بيماري زاست ، اما غير قابل كشت ( در محيط آزمايشگاهي ) مي‌باشد و به مخاط معده متصل مي‌شود ( در كل در هر دو شكل قابل زيست و بيماري زاست ) . طبق تخمينها حدود ۵۰ - ۲۵ درصد افراد كشورهاي توسعه يافته و تا ۷۰ الي ۹۰ ٪ افراد در كشورهاي در حالت وسعه آلوده به اين باكتري هستند . در مناطق در حالت وسعه ممكن است تا ۸۰ ٪ جمعيت تا سن ۲۰ سالگي به اين عفونت آلوده شوند . هر چه سن بالاتر برود احتمال گرفتار شدن فرد هم بيشتر مي‌شود . وضع بد اجتماعي ، اقتصادي و تحصيلات كمتر از عواملي هستند كه احتمال بروز اين عفونت را در فرد بالا مي‌برد . از عوامل دخيل ديگر تراكم جمعيت ، زندگي در شرايط غير بهداشتي ، غذا يا آب آلوده و تماس با محتويات معده افراد آلوده را مي‌توان نامبرد . انتقال اين بيماري از راه فرد به فرد ، و عمدتاً از راه‌هاي دهاني – دهاني يا دهاني-مدفوعي انجام مي‌شود . از لحاظ باليني شناسايي عفونت هليكوباكتر پيلوري به يك آزمايش تشخيصي نياز دارد كه ارزان و دقيق قابل دسترس ميباشد . كشت و تكثير باكتري ها در محيط هاي مصنوعي از مهمترين روشهاي تشخيصي در باكتري شناسي است . براي كشت موفق بايد شرايط مناسب براي رشد باكتري فراهم گردد . از جمله اين شرايط مواد غذايي – حرارت - رطوبت كافي - نمك- PH مناسب – حضور يا عدم حضور اكسيژن ميباشد . محيط هاي كشت را متناسب با نوع آزمايش مي‏توان به دو صورت مايع و جامد تهيه كرد . به منظور مقايسه تشخيص باكتري هليكوباكتر و تاييد بيماري معدي به وسيله متخصص پاتولوژيست انجام گرديد.از هر بيمار دو نومنه بيوپسي تهيه شد و اين نمونه ها در داخل يك لوله شامل محيط كشت انتقالي(Brain Heart Infusion broth حاوي 20% گلوكوز) قرار داده شدند. و به آزمايشگاه جهت كشت هرچه زودتر اقدام شد. هر بيوپسي به سه قسمت، تقسيم شده كه يك قسمت آن بلافاصله به لوله آزمايش حاوي تست سريع اوره آز منتقل شد. قسمت ديگر آن به منظور تهيه اسمير و اسلايد ميكروسكوپي آن استفاده شده و قسمت آخر با استفاده از لوپ كاملا استريل بر روي محيط كشت انتخابي و ابداعي قرار داده شد. همچنين به منظور مقايسه محيط كشت ابداعي، از محيط كشت بروسلا آگار(Merck, Germany) حاوي 10 درصد خون ليز شده اسب و آمفوتريسين B، تريمتوپريم و ناليديكسيك اسيد استفاده شد. محيط كشت ابداعي با پايه كلمبيا آگار(Merck, Germany)مي باشد كه حاوي 10 درصد خون اسب هموليز شده، 0.25% عصاره مخمر، 7 درصد سرم جنين گاو به همراه آمفوتريسينB، تريمتوپريم و وانكومايسين مي باشد. نمونه هاي كشت داده شده در يك شرايط جوي ميكروآئروفيليك با استفاده از Anoxomate در دماي 37 درجه سانتي گراد فراهم شد. از ميان همه نمونه ها 127 مورد مثبت مشاهده گرديد كه 96 درصد آن ها توسط اين محيط كشت ابداعي و 82.7% توسط محيط كشت قبلي تشخيص داده شدند. اين محيط كشت ابداعي فاقد هرگونه آلودگي با انواع ديگر باكتري ها مي باشد. ضمنا مزاياي اين اختراع به شرح ذيل است: 1- فرمولاسيون ساده و ارزان و هزينه اندك توليد انبوه محيط كشت 2- تشخيص اختصاصي و جدا سازي دقيق و قابل اعتماد باكتري هليكوباكتر پيلوري 3- سهولت استفاده از اين محيط كشت 4- سرعت بالا و مدت زمان اندك پاسخ دهي تشخيصي 5- عدم آلودگي اين محيط كشت با ساير باكتري هاي موجود

هليكوباكترپيلوري گونه‌اي از باكتري هليكوباكتر بوده وشايع‌ترين موجود ذره ‌بيني است كه انسان ‌ها را در بعد جهاني مبتلا به عفونت ساخته است . بيش از نيمي از مردم دنيا آلوده به اين باكتري هستند . باكتري مذكور عامل اصلي بيماريي‌هايي مثل زخم معده و ناراحتي‌هاي معده و ابتداي روده محسوب مي‌شود . آمار مبتلايان به اين ميكروب در كشورهاي جهان سوم و ايران درصد بسيار بالاتري دارد ( حدود 74 درصد ازجمعيت بالاي سي وپنج سال در ايران ) . هليكوباكتر پيلوري اصولاً باكتري مارپيچي مي‌باشد ، اما مي‌تواند به شكل كروي هم تغيير شكل پيدا كند كه اين شكل هم قابل زيست نو بيماري زاست ، اما غير قابل كشت ( در محيط آزمايشگاهي ) مي‌باشد و به مخاط معده متصل مي‌شود ( دركل در هر دو شكل قابل زيست و بيماري زاست ) . طبق تخمينها حدود ۵۰-۲۵درصد افراد كشورهاي توسعه يافته و تا ۷۰ الي۹۰٪ افراد در كشورهاي در حالت وسعه آلوده به اين باكتري هستند . در مناطق در حالت و سعه ممكن است تا۸۰ ٪ جمعيت تا سن ۲۰سالگي به اين عفونت آلوده شوند . هر چه سن بالاتر برود احتمال گرفتارشدن فرد هم بيشتر مي‌شود . وضع بد اجتماعي ، اقتصادي و تحصيلات كمتر از عواملي هستند كه احتمال بروز اين عفونت را در فرد بالا مي‌برد . از عوامل دخيل ديگر تراكم جمعيت ، زندگي در شرايط غير بهداشتي ، غذايا آب آلوده و تماس با محتويات معده افراد آلوده را مي‌توان نامبرد . انتقال اين بيماري از راه فرد به فرد ، و عمدتاً از راه هاي دهاني – دهاني يا دهاني – مدفوعي انجام مي‌شود . چندين آزمون تشخيصي براي تشخيص هليكوباكتر پيلوري در دسترس است. روش هاي تهاجمي مانند كشت ، بافت شناسي ، آزمون و روش مولكولي نيازمند جمع آوري بيوپسي است . در روشهاي غير تهاجمي از ايمنواسي ، و نمونه مدفوع استفاده ميشود . اين بررسي برروي 100 نمونه بيوپسي معده بيماران مبتلا به ناراحتي¬هاي مختلف گوارش مراجعه كننده به بخش آندوسكوپي درمانگاه مطهري شيراز انجام خواهد گرفت.ابتدا دراتاق آندوسگوپي توسط پزشك متخصص از معده هر بيمار 3 بيوپسي از بافت معده تهيه شده و سريعأ به محيطهاي تجاري CLO-Test , محيط اوره آز سريع جامد و محيط ترانسپورت هر كدام يك بيوپسي وارد كرده و به آزمايشگاه منتقل خواهند شد. در عين حال محيط¬هاي اوره آز سريع از ابتداي تلقيح نمونه ها مورد بررسي قرار مي گيرند و در هر زمان كه نتيجه مثبت شد ثبت مي گردد. مشخصات بيماران نيز از نظر سن، جنس، نوع بيماري، نوع داروهاي مصرفي و غيره در پرسشنامه هاي جمع آوري خواهند شد. پس از انتقال محيط¬ها به آزمايشگاه محيط¬هاي اوره آز سريع تا حدود 24 و حداكثر 72 ساعت هر 1 ساعت يكبار مورد بررسي قرار مي گيرند. بيوپسي هايي را نيز كه با محيط ترانسپورت به آزمايشگاه منتقل شده¬اند در آزمايشگاه در شرايط استريل بصورت هموژن درآورده و در محيط اختصاصي هليكوباكتر كشت داده شده و درشرايط ميكرو¬آئروفيليك نگهداري مي شوند و تا 8-7 روز رشد باكتري در آن¬ها كنترول مي شود. درصورت رشد باكتري جهت تائيد بعنوان هليكوباكتر پيلوري با رنگ آميزي گرم , اوره¬آز ,كاتالاز و اكسيداز مورد بررسي قرار مي گيرند. در نهايت پس ازجمع آوري اطلاعات نتايج با يكديگر مقايسه شده و با تستهاي آماري validity محيط تست اوره آز سريع جامد فرموله شده در آزمايشگاه تعيين مي گردد تا در صورت مورد قبول بودن بتواند به صورت كيتهاي آماده جايگزين محيطهاي مشابه خارجي و نيز محيطهاي مايع داخلي شوند.ضمنا مزاياي اختراع فوق به شرح زير است: 1- فرمولاسيون ساده و ارزان كيت و هزينه اندك توليد انبوه كيت 2- تشخيص دقيق و قابل اعتماد باكتري هليكوباكتر پيلوري 3- سهولت استفاده از اين كيت 4- سرعت بالا و مدت زمان اندك پاسخ دهي تشخيصي اين كيت