لیست اختراعات با مالکیت
پژوهشگاه پژوهشگاه ملي مهندسي ژنتيك
22 عدد
ليپازها (تري آسيل گليسرول آسيل هيدرولاز EC 3.1.1.3 ) از مهم ترين آنزيم هاي صنعتي هستند كه در صنايع مختلف از جمله صنايع غذايي، شوينده ها، توليدات دارويي، چرم، پارچه، لوازم آرايشي، و كاغذ كاربرد دارند. ليپازهاي باكتريايي عضوي از خانواده β/α هيدرولازها هستندكه تري آسيل گليسرول ها را در فاز بين آب-چربي هيدروليز مي كنند. بهبود ويژگي سوبسترايي و فعاليت كاتاليتيك ليپازها در كاربردهاي تجاري اهميت زيادي دارد. ممانعت فضايي از عواملي است كه در دسترسي سوبسترا به جايگاه فعال آنزيم مشكل ايجاد مي كند. به منظور كاهش ممانعت فضايي و افزايش فضاي جايگاه فعال، فنيل آلانين 17 در درپوش ليپاز كايمريك باسيلوس ترموكاتنولاتوس كه به سمت جايگاه فعال جهت گيري كرده با جهش هاي هدايت شده در محل با سرين جايگزين شد. اين جهش فاصله بين فنيل آلانين 17را تا سرين كاتاليتيك 114 كه در قعر جايگاه فعال آنزيم قرار گرفته 15/4 انگستروم افزايش داد. نتايج نشان داد كه اين جهش فعاليت كلي ليپاز را در حضور اكثر سوبسترها به خصوص سوبستراهاي 8كربنه (U/mg 874)، 10 كربنه (U/mg 836) افزايش داد. همچنين در نتيجه اين جهش فعاليت ليپاز جهش يافته در تمام دماها بالاتر از ليپاز كايمريك بود.و فعاليت ليپاز جهش يافته در pH 9.5 بهينه(U/mg 4950) در مقايسه با ليپاز كايمريك (U/mg 3450) افزايش قابل توجهي را نشان داد. فعاليت آنزيم ليپاز جهش يافته در حضور حلال هاي آلي، مواد پاك كننده، و يونهاي فلزي نيز از ليپاز كايمريك بهبود يافته است.
واكسني براي كنترل Clostridium perfringens در حيوانات و خصوصاً انتريت نكروتيك در طيور تهيه شده است. اختراع حاضر توسعه و توليد واكسن طيور مي باشد كه مشتمل بر يك پروتئين آنتي ژنيك واحد كه از دومين آنتي ژنيك انتهاي كربوكسي آنتي ژنيك پروتئين آلفا توكسين كه با يك رابط پپتيدي آلفا هليكال به دومين آنتي ژنيك انتهاي كربوكسي پروتئين NetB متصل مي گردد، همچنين اين دو واحد بوسيله يك رابط پپتيدي آلفا هليكال به جايگاه فعال پروتئين متالوپپتيداز روي متصل مي گردند.اختراع ارائه شده يك سلول گياهي شامل پروتئين هاي آنتي ژنيك توصيف شده، نوكلئيك اسيد توصيف شده، كاست بياني توصيف شده و يا وكتور نوتركيب توصيف شده مي باشد.اختراع حاضر واكسني را ارائه ميدهدكه اين واكسن در تحريك سيستم ايمني همورال در پاسخ به باكتري C . perfringens و محافظت در برابر بيماري نكروتيك انتريتيس به طور موثري تاثير گزار مي باشد. روش هاي توليد و واكسيناسيون طيور نيز فراهم اورده شده است
خلاصهاي از توصيف اختراع؛ پسته (Pistacia vera) يكي از مهم¬ترين محصولات باغي جهان است. در بين كشورهاي توليد كننده اين محصول، ايران بيشترين سطح زير كشت اين محصول را به خود اختصاص داده است. در سال هاي اخير خشكي و شوري مفرط ناشي از تغييرات اقليم علاوه بر از بين بردن جنگل¬هاي وحشي اين گونه گياهي، توليد و صادرات اين محصول استراتژيك را به چالش كشيده است. در چنين شرايطي حفاظت و تكثير ژنوتيپ¬هاي موجود و مقاوم به شرايط سخت از اهميت ويژه¬اي برخوردار است. امروزه ريزازديادي يكي از درآمدزاترين تكنيك¬هاي حوزه زيست فناوري گياهي مي¬باشد و بسياري از گياهان برگزيده را با استفاده از اين تكنيك تكثير مي¬كنند. در ميان روش¬هاي ريزازديادي جنين¬زايي غيرجنسي از اهميت ويژه¬اي برخوردار است. از مزاياي جنين¬زايي غيرجنسي مي¬توان تكثير انبوه گونه¬هاي گياهي، توليد همزمان ريشه و ساقه و كاهش هزينه¬هاي ريزازديادي ، توليد گياهان دابل هاپلوئيد، توليد بذر مصنوعي، حفاظت از ژرم پلاسم¬ها و انجماد فراسرد را نام برد. در اين فرآيند ما با كشت جنين¬هاي نابالغ زيگوتي بر روي محيط كشت MS2/1 به همراه L-گلوتامين، در ليتر كازئين هيدروليزات و مقدار 01/0 ميلي¬گرم در ليتر از يكي از هورمون¬هاي NAA، IBA و 2,4-D موفق به توليد جنين¬هاي رويشي در گياه پسته شديم. از اين پروتوكل مي¬توان علاوه بر تكثير پسته ايراني در برنامه¬هاي اصلاحي پسته نيز استفاده كرد.
خلاصه: قسمت اول فرايند فوق شامل يك بخش جهت ورود پروتئوم مورد نظر محقق براي جستجو در آن مي باشدكه شامل بخشي جهت دريافت موتيف يا دومين مورد نظر و جستجو گر براي يافتن پروتئين مورد نظر داراي موتيف يا دومين مورد نظر مي باشد، كه پس از جستجو پروتئين هاي مربوطه در جدولي ارائه خواهند شد . در قسمت دوم فرايند يك بخش ورود نام لاكتوباسيلوس مورد نظر جهت فراخواني نوع خاصي از پروتئين ها بنام پروتئين هاي وابسته به سورتاز SDPs موجود درآن باكتري از بانك داده ي فرايند موجود مي باشد . كه پس از جستجوي بانك داده، SDP هاي موجود در لاكتوباسيلوس مد نظر همراه با اطلاعاتي شامل كد شناسايي پروتئين و نام پروتئين و تعداد كل اسيد هاي آمينه موجود در آن ارائه داده خواهند شد .
پوشينه هاي متشكل از اجزاء طبيعي كه توسط روش الكتروريسي تهيه شده به علت ممانعت از نفوذ عوامل بيماري زا به محيط زخم, هوادهي مناسب , جذب ترشحات و رهايش كنترل شده داروها , ساختارهايي بسيار مناسب براي كاربردهاي بهداشتي هستند. در اين نوآوري از پليمرهاي پلي ونيل الكل, كيتوزان و هيالورونيك اسيد كه داراي ويژگيهاي زيست سازگاري, زيست تخريب پذيري غير ايمونولوژيك و غير سمي بودن هستند براي تهيه نانو الياف به روش الكتروريسي استفاده شد. نانوالياف تهيه شده به عنوان پوشينه اي براي رسانش هورمون رشد مورد بررسي قرار گرفت. ويژگي هاي نانوالياف مثل اندازه , خصوصيت آب دوستي, ميزان سميت سلولي و الگوي رهايش هورمون رشد سنجش شد.
بيان بيش از حد مولكول¬هاي VEGF و PLGF در نورگ¬زايي پاتولوژيك بسياري از بيماري¬ها نظير تحليل ماكولاي وابسته به سن (AMD) و سرطان نقش كليدي ايفا مي¬نمايد. بنابراين بسياري از داروهاي در دسترس براي درمان بيماريهاي مرتبط با آنژيوژنز، بر پايه مكانيسم مهار اين دو مولكول (به خصوص VEGF) مي¬باشند. با اين وجود تجربه باليني نشان مي-دهد كه كارآرايي چنين درمان¬هايي بواسطه¬ي دور زدن روند ايجاد آنژيوژنز به مسير پيام¬رساني ديگر، منجر به شكل¬گيري مكانيسم¬هايي جهت مقاومت ميگردد. مكانيسم ايجاد كننده مقاومت نسبت به مهار VEGF، افزايش ANG-2 و PlGFمي-باشد. نكته ديگر اين كه درمانهاي مبتني بر ضد VEGF نيز افزايش ANG-2 و PlGF را به دنبال دارد. اين فناوري طراحي و ساخت يك مولكول سه¬گانه جديد مبتني بر sFLT01 است كه متشكل از بخش¬هاي مهم گيرنده مولكولهاي VEGF و PLGF و تركيب آن¬ها با قطعات متغير تكرشتهاي (scFV) از آنتي¬بادي مرتبط با ANG2 است بطوريكه بتواند با اتصال همزمان به اين سه مولكول، مانند يك آنتيبادي تتراوالانت عمل نموده و آنها را خنثي نمايد. اين مولكول نه تنها منجر به تاثيرگذاري بيشتر در مهار فرم بيماريزاي رگزايي شده بلكه از شكل¬گيري مقاومت نسبت به آن نيز جلوگيري مينمايد. دليل اين امر مهار همزمان دو مسير مهم دخيل در فرايند رگ¬زايي مي¬باشد.
در اين اختراع يك نانوسامانه مبتني بر نانوذرات سيليكاي متخلخل كه با دو عامل ضد ميكروبي بارگذاري شدند، تهيه شده و فعاليت ضدميكروبي نانوسامانه هاي به دست آمده ارزيابي شد. بيشترين ميزان ظرفيت بارگذاري براي ونكومايسين (6/53 ميكروگرم) و براي ليزوزيم (3 /883 ميكروگرم ) به ازاي 1 ميلي-گرم نانوذرات به دست آمد. حداقل غلظت بازدارندگي (MIC) در برابر استافيلوكوكوس اورئوس براي ليزوزيم و ونكومايسين آزاد در تركيب (به ترتيب 675/0 ميلي گرم بر ميلي ليتر و 562/1 ميكروگرم بر ميلي ليتر)، در مقايسه با حالت آزاد تنها (ليزوزيم 7/2 ميلي گرم بر ميلي ليتر و ونكومايسين 25/6 ميكروگرم بر ميلي ليتر) بيش از 75% كمتر است. مقدار MIC براي ليزوزيم بارگذاري شده و ونكومايسين بارگذاري شده به صورت تركيبي (ليزوزيم 168/0 ميلي گرم بر ميلي ليتر و ونكومايسين 781/0 ميكروگرم بر ميلي ليتر) در مقايسه با مقدار MIC براي حالت بارگذاري شده از هر كدام به تنهايي (ليزوزيم 675/0ميلي گرم بر ميلي ليتر و ونكومايسين 125/3 ميكروگرم بر ميلي ليتر) به ترتيب در حدود 68% و 75% كاهش نشان داد. در مورد نمونه هاي هم بارگذاري شده نتايج مشابهي به دست آمد. بررسي شاخص غلظت بازدارندگي سهمي (FICI) نشان داد كه برهم كنش ضدميكروبي ونكومايسين و ليزوزيم در سامانه¬هاي تهيه شده از نوع هم افزايي است.
آلفا 1 - آنتي تريپسين يك مهاركننده سرين پروتئازها است كه به طور عمده توسط سلول هاي كبدي سنتز مي شود و از اثرات مخرب پروتئازها عليه بافتهاي مختلف محافظت مي كند. نقص اين مهاركننده كه منحر به بيماريهاي ناشي از آسيب هاي پروتئازها مي گردد. اولين راه شناخته شده توليد اين پروتئين جداسازي از پلاسما بوده ولي امروزه به علت مشكلاتي كه در اين راه موجود است توليد آن به صورت نوتركيب با استقبال بيشتري مواجه است. در اين اختراع ژن آلفا 1- آنتي تريپسين انساني به نفع مخمر متيلوتروفيك پيكيا پاستوريس مهندسي شد تا ميزان بيان پروتئين نوتركيب افزايش يابد. بدين منظور تمامي كدونها ژن به نفع مخمر پيكيا پاستوريس بهينه سازي شده اند و از توالي راهنماي خود ژن آلفا 1- آنتي تريپسين استفاده گرديده است. توليد پروتئين بيان شده ضمن ترشح به محيط كشت، بيش از سه برابر افزايش بيان نسبت به بيان ژن طبيعي نشان داد.
ليپازها (تري اسيل گليسرول هيدرولاز و E.C.3.1.1.3)، آنزيم هايي هستند كه تري اسيل گليسرول ها را در فصل مشترك آب - روغن هيدروليز مي كنند. ليپازها توسط باتري ها، قارچ ها و همچنين حيوانات و گياهان توليد مي شوند. بهبود ويژگي سوبسترايي و فعاليت كاتاليتيك ليپازها در كاربردهاي تجاري اهميت زيادي دارد. ممانعت فضايي از عواملي است كه در دسترسي سوبسترا به جايگاه فعال آنزيم مشكل مي كند. به منظور كاهش ممانعت فضايي و افزايش فضاي جايگاه فعال آنزيم، فنيل آلاتين 177 در درپوش ليپاز باسيلوس ترموكاتنولاتوس كه به سمت جايگاه فعال جهت گيري كرده با جهش زايي هدايت شده در محل با آلاتين جايگزين شد. اين جهش فاصله بين فنيل آلانين 177 را تا سرين كاتاليتيك 114 كه در قعر جايگاه فعال آنزيم قرار گرفته 4/15 انگستروم افزايش داد. نتايج نشان داد كه اين جهش فعاليت كلي ليپاز را در حضور سوبستراي 4 كربنه در مقايسه با آنزيم طبيعي تا 4/46 برابر (U/mg 8670) افزايش داد. در نتيجه اين جهش فعاليت مطلوب ليپاز 65 درجه سانتيگراد بيشتر از 55 درجه سانتيگراد است. اين جهش همچنين كارايي ليپاز را در حضور تري اسيل گليسرول ها، pHها، حلال هاي آلي، يون هاي فلزي و دترجنت ها فاكتورهاي متفاوت مقايسه با ليپاز نوتركيب طبيعي افزايش داد.
خلاصه اختراع ليپازها (EC 3.1.1.3) آنزيمهايي هستند كه درشرايط فيزيولوژي پيوند استري را در تريآسيلگليسريدها هيدروليز ميكنند و اسيدهاي چرب آزاد، ديگليسريد، مونوگليسريد و گليسرول توليد ميكنند. با اين حال فعاليت آنها محدود به تريآسيلگليسريدها نيست. كشور ما همه آنزيم مورد نياز براي صنايع شوينده را از طريق واردات تأمين ميكند كه براي برون رفت از اين معضل بايد طيف مطالعات بر روي آنزيمهاي صنعتي گستردهتر شود و وارد فاز صنعتي توليد آنها شد. ليپاز مورد نظر ما به دليل داشتن فعاليت در دماي بالا و پايداري قليايي، ميتواند در صنايع شوينده و چرم سازي مورد استفاده قرار گيرد. اين ليپاز متعلق به سويه ترموفيل بومي Cohnella A01 ميباشد. اين باكتري از استخرهاي آب گرم استخراج شده است. ژن اين ليپاز در حامل باكتريايي كلون شد و بعد از بيان شدن پروتئين مورد نظر و خالص سازي آن، مورد بررسي قرار گرفت. اين ژن داراي 807 نوكلئوتيد معادل 268 اسيدآمينه ميباشد و پروتئين آن 5/29 كيلودالتون وزن دارد كه طبق نرم افزارهاي پيش بيني ساختار، ساختار آن كروي ميباشد و سه اسيدآمينه سرين، هيستيدين و آسپارتيك اسيد جايگاه فعال آنزيم را تشكيل دادهاند. فعاليت آنزيم با پارا نيتروفنيل پالميتات اندازهگيري شد كه بيشترين فعاليت آنزيم در محدوده دمايي 60 تا 70 درجه سانتيگراد و محدوده pH 7-10 ميباشد. اين آنزيم در حضور اكثر دترجنتها، حلالهاي آلي و يونهاي فلزي از فعاليت بالايي برخوردار ميباشد.
موارد یافت شده: 22