كیت تعیین هموگلوبین D-Iran در بیماری هموگلوبین D-Iran به روش مولكولی

خلاصه اختراع :

هموگلوبین D-Iran یك نوع نادر هموگلوبین است كه برای اولین بار در خانواده ای از مناطق مركزی ایران در سال 1973 توسط Rahbar گزارش شد و به دلیل جهش در كدون 22 ژن β-گلوبین است كه موجب تبدیل GAA به CAA است كه منجر به جایگزینی گلوتامات توسط گلوتامین می شود. تركیب Hb D-Iranو بتا تالاسمی هتروزیگوت، كم خونی متوسط، خستگی و ضعف را نشان می دهد. بیماران با Hb D-Iran هموزیگوت دارای كم خونی خفیف با شاخص های گلبول قرمز مشابه با تالاسمی می باشند. روش: روش اجرایی مصرف این كیت تشخیصی به این صورت میباشد كه برای انجام PCR، از روش Tetra-ARMs-PCR استفاده میشود. سپس پرایمرهای Inner و Outer مربوط به آلل های G و C از ژنوتیپ Hb D-Iran را با هم و همزمان در دستگاه ترموسایكلر قرار داده و پس از آن با الكتروفورز افقی ژنوتیپ Hb D-Iran مشخص می‌گردد كه حاصل آن، یك قطعه (باند) 321bp نشان دهنده وجود ژن Hb بتا، قطعه 255bp نشان دهنده وجود آلل G (Hb A) و قطعه 103bp نشان دهنده وجود آلل C (Hb D-Iran) می باشد. عدم وجود هر كدام از این قطعه ها در ژل الكتروفورز به معنای نبود ژن هموگلوبین مورد نظر است. از این كیت می‌توان به عنوان تشخیص قطعی بیماری و تشخیص قبل از تولد هموگلوبین D-Iran استفاده كرد. حتی تشخیص بیماری هموگلوبین D-Iran جنین در زمان بارداری از طریق FFDNA یا DNA آزاد جنینی در خون مادر یا استفاده از مایع آمنیوتیك و یا پرزهای جنینی را می‌توان با این كیت انجام داد.