روش انساني كردن آنتي بادي ها يكي از تكنيك هاي پيشرفته مهندسي ژنتيك و همولوژي مدلينگ است. اين تكنيك در سراسر دنيا شناخته شده و با استفاده از روش هاي استاندارد در مورد آنتي بادي ها انجام گرفته و براي اولين بار نيست كه در دنيا با اين روش آنتي بادي هاي درماني موشي براي كاهش ايمني زايي به اين شكل توليد مي شوند. با وجود اين، سالانه تعداد زيادي آنتي بادي هاي موشي جديد كه پتانسيل درماني دارند به فرم انساني شده تبديل شده و ثبت اختراع مي شوند. اين ثبت اختراع ها بمنظور حمايت از نوع توالي اسيد آمينه اين آنتي بادي ها انجام مي گيرد كه خصوصيات منحصر بفرد بيولوژيك يك آنتي بادي را تعيين مي كنند. موضوع اين اختراع حمايت از توالي اسيد آمينه يك آنتي بادي انساني شده با نام هرسينتوزوماب (Hersintuzumab) است كه داراي اثرات مهار رشد و تكثير روي سلول هاي سرطاني با بيان بالاي گيرنده شماره 2 فاكتور رشد انساني (HER2) مي باشد. آنتي بادي هرسينتوزوماب در تركيب با آنتي بادي تجاري Trastuzumab داراي اثرات مهاري قوي تري روي رشد سلول هاي سرطاني نسبت به تركيب دو آنتي بادي تجاري Trastuzumabو Pertuzumab است و مي تواند در درمان انواع سرطان ها بصورت جدا يا تركيبي مورد استفاده قرار بگيرد.

كونژوگه Poly-HRP به عنوان شناساگر در آزمون ايمونوهيستوشيمي: مشكل اصلي در سيستم هاي تشخيصي پاتولوژي مبتني بر روشهاي ايمونوهيستوشيمي، حساسيت پايين است. در غالب موارد آزمونهاي ايمونوهيستوشيمي از يك آنتي بادي اوليه و يك آنتي بادي ثانويه كنژوگه با HRP براي تشخيص بيان آنتي ژن استفاده مي¬شود. ولي اين آنتي بادي ثانويه فاقد حساسيت لازم در بررسي بيان بسياري از آنتي ژن هاي با بيان پايين مي باشد. محصول مورد ادعا در اين ثبت اختراع يك معرف ثانويه مبتني بر پليمر متصل با آنزيم HRP و آنتي بادي ثانويه ضد ايمنوگلوبولين خرگوش و موش مي¬باشد كه قادر است هر آنتي بادي اوليه با منشا خرگوشي يا موشي به آنتي ژن¬هاي سلول يا بافت را فارغ از محل قرارگيري آنتي ژن با حساسيت فوق العاده زياد در آزمون ايمونوهيستوشيمي شناسايي نمايد. در تهيه اين سامانه، ابتدا دكستران اكسيد شده تا گروه هاي عاملي آلدئيدي ايجاد گردد. سپس، آنزيم HRP و كونژوگه آنتي بادي-HRP از طريق گروه آمين و تشكيل پيوند آميدي به دكستران متصل شد. اين محصول همزمان تعداد زيادي از آنزيم HRP متصل به يك پليمر را براي افزايش واكنش آنزيمي و افزايش حساسيت تشخيص بيان آنتي ژن در اختيار مي¬دهد.

آنتی بادی خرگوشی ضد ایمونوگلوبین موش متصل شده به انزیم پراکسیداز

1- توليد كنژوكه آنزيمي آنتي بادي پلي كلونال گوسفندي ضد ايمونوگلوبولين انسان موسوم ugated Sheep Anti-Human lg - Peroxidase-Cor ، براي اولين بار در ايران توسط پژوهشگاه فن آوري هاي نوين علوم زيستي ابن سينا محقق شده است. 2- اين آنتي بادي از ايمونيزاسيون گوسفند با ايمونوگلوبولين انساني تخليص شده با ستون جذبي حاوي پروتئين A استرپتوكوك توليد شده است. درجه خلوص ايمونوكلوبولين انساني بيش از ٩۵ درصد مي باشد. 3- آنتي بادي اختصاصي موجود در سرم گوسفند ايمن شده با روشهاي كروماتوكرافي جذبي و با استفاده از ستون حاوي رزين متصل به ايمونوگلوبولين خالص انساني تخليص گرديد. آنتي بادي تخليص شده بيش از ٩۵ درصدخلوص دارد. 4- اين كنژوگه جهت استفاده در آزمون هاي مختلف منجمله ايمونوبلاتينگ، ايمونوسيتوشيمي و الايزا كاربرد دارد. 5- اين كنژوكه با سرم ميمون: ۵٠ درصد، سگ: 30 درصد , اسب، خوكچه هندي، رت: 15 درصد• موش و گربه: 10درصد . خركوش: 8 درصد , مرغ: ۵ درصد و با ايمونوگلوبولين بز هيچكونه واكنش متقاطعي ندارد. 6- اين كنژوكه در بافر فسفات سالين pH 2/7 و مولاريته 15 صدم حاوي ١ صدم تايمروسال و o/ol BSA يك درصد تا حداقل ٣ سال قابل نگهداري مي باشد. 7- درتوليد اين كنتوژگه هيچگونه دستكاري ژنيتيكي اعم از IN VIVO، IN VITRO صورت نگرفته و توليد آن مغايرتي با بند ماهد 4 قانون ثبت اختراعات، طرح هاي صنعتي و علائم تجاري ندارد.

نام فرآورده: Rabbit Anti-Human lg Mouse lg Adsorbed شماره فرآورده: 13 1 SPH مشخصات فرآورده: حيوان ميزبان: خرگوش ايمونوژن: ايمونوگلوبولين انسان lgA. lgM. IgG كه از طريق كروماتوگرافي جذبي Affinity chromatography بدست آمده است. نخليص آنتي بادي: ١ - آنتي بادي Rabbit Anti-Human lg از طريق كروماتوگرافي جذبي با استفاده از ايمونوكلوبولين انسان متصل به Sepharose-4B تخليص گرديد. ٢ - واكنش متقاطع آن با ايمونوگلوبولين موش با استفاده از ستون جذبي Mouse lg حذف گرديد. غلظت بروتثيئ: نيم mg/ml واكنش متقاطع با سرم حيوانات: ميزان واكنش متقاطع با سرم ميمون حدود ١٠٠ درصد، سگ: 5/12 درصد اسب : 10 درصد بز: 6 درصد، 4رت: درصدگوسفند: 3 درصد خوكچه هندي و گربه: 1/5 موش: 1 درصد و با سرم مرغ كمتر از ١ دصد مي بامئند. موارد استفاده: ١ - الايزا Enzyme-linked mmunosorbent Assay ٢ - ايمونوديفوزيون Immunodiffusion 3~ هماكلوتيناسيون Haemagglutination نحوه نگهداري: آنتي بادي را در ويالهاي كوچك در ºc • ٢ - نكهداري كرده و از منجمد كردن و ذوب كردن آن به طور متوالي خودداري كنيد. كيفيت اين فرآورده به تاييد آزمايشكاه رفرانس وزارت بهداشت، درمان و آموزش پزشكي رسيده است.

خلاصه آنتي بادي هاي پلي كلونال، محصول كلون هاي متفاوتي از لنفوسيت هاي B هستند كه در پاسخ به آنتي ژن توليد مي شوند و به اپي توپ هاي گوناگون ايمونوژن متصل مي گردند. اين آنتي بادي ها به دنبال ايمونيزاسيون يك حيوان كه معمولا خرگوش، گوسفند و يا بز است، توليد مي گردند. مزيت مهم آنتي بادي هاي پلي كلونال در خصوصيت آنها براي تشكيل كمپلكس هاي ايمني نامحلول بزرگ با آنتي ژن يا آگلوتينه كردن سلول ها مي باشد. اين آنتي بادي ها از ايزوتيپ هاي متفاوت تشكيل شده و ناهمگن مي باشند و از نظر ميل پيوندي در طيف وسيعي قرار گرفته و اتصال آنها به آنتي ژ ويژه شان ، تحت طيف وسيعي از PH (9-4 و غلظت (1-0 مولار) نمك طعام پايدار است. با توجه به اينكه در اكثر تستهاي تشخيصي و تحقيقاتي، آنتي بادي هاي پلي كونال از ابزارهاي اصلي بوده و كاربرد بسيار وسيعي در زمينه تحقيق و تشخيص دارند، لذا ساخت و توليد اين مواد با توجه به نيازهاي مختلف بسيار حايز اهميت است. اين آنتي بادي هاي در الايزا، ايمونوديفوزيون، هماگلوتيناسيون و آنتي بادي هاي نشاندار شده با ماده فلورسانس در زمينه هاي ايمونوهيستوشيمي، ايمونوفلورسانس و آنتي بادي هاي نشاندار شده با آنزيم در ايمونوبلات، الايزا و ايمونوسيتوشيمي كاربرد دارند. به همين دليل، بسياري از اين آنتي بادي ها در كيت هاي تشخيص طبي استفاده مي شوند. با توجه به اينكه آنتي بادي هاي موشي در تستهاي تشخيصي و خصوصا تحقيقاتي بسيار كاربرد دارند نياز وسيعي به آنتي بادي پلي كلونال خرگوشي ضد ايمونوگلوبولين موش احساس مي شد. توليد آنتي بادي خرگوشي ضد ايمونوگلوبولين موش (Rabbit Anti Mouse Ig) براي اولين بار در ايران توسط پژوهشگاه فن آوري هاي نوين علوم زيستي جهاد دانشگاهي - ابن سينا انجام شد. خلاصه توصيف نام فرآورده :rabbil anti-mouse ig شماره فرآورده :sph 114 مشخصات فرآورده : حيوان ميزبان :خرگوش ايمونوژن:ايمنوگلوبولين موش كه از طريق كروماتوگرافي جذبي (affinily chrornatography )بدست امده است تلخيص آنتي بادي : آنتي بادي rabbil anti-mouse ig از طريق كروماتوگرافي جذبي بااستفاده از ايمونوگلوبولين موش متصل به sepharose-4b تخليص گرديد غلظت پروتئين : ./5mg/ml حلال: pbs(0/15m وph:7/2 )واجد تايمر وسال 1./.% واكنش متقاطع با سرم حيوانات :ميزان واكنش متقاطع با سرم رت :25%،بز:5/12%،مميون،خوكه هندي واسب :6%، انسان وسگ :5%، گربه وگوسفن :3%وبا سرم مرغ كمتر از 1% مي باشد موارد استفاده : 1-الايزاenzyme-linked immunosorbent assay 2-ايمونوديفوزيون immunodiffusion 3-هماگلوتيناسيون haemagglutination نحوه نگهداري :آنتي بادي رادر ويالهاي كوچك در 20-درجه سانتيگراد نگهداري كرده واز منجمد كردن وذوب كردن آن به طور متوالي خوداري كنيد كيفيت اين فرآورده به تاييد آزمايشگاه رفرانس وزارت بهداشت درمان وآموزش پزشكي رسيده است خلاصه توصيف اختراع آنتي بادي خرگوش ضد ايمونوگلوبولين موش آنتي بادي هاي پلي كلونال محصول كلون هاي متفاوتي از لنفوسيت هاي b هستند كه در پاسخ به آنتي ژن مي شوند وبه اپي توپ هاي گوناگون ايمونوژن متصل مي گردند اين آنتي بادي ها به دنبال ايمونيز اسيون يك حيوان كه معمولا خرگوش ، گوسفند ويابز است توليد مي گردند مزيت مهم آنتي بادي هاي پلي كلونال درخصوصيات آنها براي تشكيل كمپلكس هاي ايمني نامحلول بزرگ با آنتي ژن يا آگلوتينه كردن سلول ها مي باشد اين آنتي بادي ها از ايزوتيپ هاي متفاوت تشكيل شده وناهمگن مي باشند واز نظر ميل پيوندي درطيف وسيعي قرار گرفته واتصال آنها به آنتي ژن ويژه شان تحت طيف وسيعي از ph(9-4)وغلظت (1-0مولار)نمك طعام پايدار است با توجه به اين كه دراكثر تستهاي تشخيصي وتحقيقاتي آنتي بادي هاي پلي كلونال از ابزارهاي اصلي بوده وكاربردبسيار وسيعي درزمينه تحقيق وتشخيص دارند لذا ساخت وتوليد اين مواد با توجه ب نيازهاي مختلف بسيار حايز اهميت است اين آنتي بادي ها درالايزا، ايمونوديفوزيون ، هما گلوتينا سيون وآنتي بادي هاي نشاندار شده با ماده فلورسانس درزمينه هاي ايمونوهيستوشيمي ، ايمونوفلورسانس وآنتي بادي هاي نشاندار شده با آنزيم درايمونوبلات ، الايزا وايمونوسيتوشيمي كاربد دارند به همين دليل بسياري ازاين آنتي بادي ها دركيت ها در كيت هاي تشخيص طبي استفاده مي شوند باتوجه به اين كه آنتي بادي هادي موشي درتست هاي تشخيصي وخصوصا تحقيقاتي بسيار كاربرد دارند .نياز وسيعي به آنتي بادي پلي كلونال خرگوشي ضد ايمونوگلوبولين موش احساس مي شد توليد آنتي بادي خرگوش ضد ايمونوگلوبولين موش (rabbit anti mouse ig )بر اي اولين بار درايران توسط پژوهشگاه فن آوري هاي نوين علوم زيستس جهاد دانشگاهي –ابن سينا انجام شد

خلاصه نام فرآورده: SPH 122 مشخصات فراورده حيوان ميزبان : گوسفند ايمونوژن: زنجيره سنگين IgD مولكول IgD انسان از سرم تصفيه شده سنگين آن، بعد از احيا IgD با استفاده از روش الكترو الوشن به دست آمده است. تخليص آنتي بادي: آنتي بادي sheep anti human IgD از طريق كروماتوگرافي جذبي با استفاده از IgD انسان متصل به sepharose-4B نحليص گرديد. غلظت پروتئين: mg/ml 5/0 حلال: PBS 1.5M و ph 7/2 واحد تايمروسال 01/0 واكنش متقاطع 1. واكنش متقاطع با ساير ايزوتيپ هاي انسان ميزان واكنش متقاطع با IgG 5/0 و با IgG: 5% و يا IgM/K,IgA/ . IgA/K 3% مي باشد. 2. واكنش متقاطع با سرم حيوانات: هيچگونه واكنش متقاطعي با سرم ميمون، گوسفند، بز، اسب، مرغ، سگ، گربه، خوكچه هندي، رت و موش ندارد. موارد استفاده: 1. آلايزا enzyme – linked immunosorbent assay 2. ايمونوديفوزيون immunodiffusion 3. هماگلوتيناسيون haemagglitination نحوه نگهداري آنتي بادي را در ويالهاي كوچك در 20- درجه سانتيگراد نگهداري كرده و از منجمد كردن و ذوب كردن آن به طور متوالي خودداري كنيد. كيفيت اين فراورده به تاييد آزمايشگاه رفرانس وزارت بهداشت، درمان و آموزش پزشكي رسيده است.

آنتي بادي هاي پلي كلونال ، محصول كلون هاي متفاوتي از لنفوسيت هاي B هستند كه در پاسخ به آنتي ژن توليد مي شوند و به اپي توپ هاي گوناگون ايمونوژن متصل مي گردند. اين آنتي بادي ها به دنبال ايمونيزاسيون يك حيوان كه معمولا خرگوش، گوسفند و يا بز است، توليد مي گردند. مزيت مهم آنتي بادي هاي پلي كلونال در خصوصيت آنها براي تشكيل كمپلكس هاي ايمني نامحلول بزرگ با آنتي ژن يا آگلوتينه كردن سلول ها مي باشد. اين آنتي بادي ها از ايزوتيپ هاي متفاوت تشكيل شده و ناهمگن مي باشند و از نظر ميل پيوندي در طيف وسيعي قرار گرفته و اتصال آنها به آنتي ژن ويژه شان تحت طيف وسيعي از PH (9-4) و غلظت (1-0 مولار ) نمك طعام پايدار است. با توجه به اينكه در اكثر تستهاي تشخيصي و تحقيقاتي ، آنتي بادي هاي پلي كلونال از ابزارهاي اصلي بوده و كاربرد بسيار وسيعي در زمينه تحقيق و تشخيص دارند، لذا ساخت و توليد اين مواد با توجه به نيازهاي مختلف بسيار حايز اهميت است. اين آنتي بادي ها در الايزا ، ايمونوديفوزيون ، هماگلوتيتاسيون و آنتي بادي هاي نشاندار شده با ماده فلورسانس در زمينه هاي ايمونوهيستوشيمي ، ايمونوفلورسانس و آنتي بادي هاي نشاندار شده با آنزيم در ايمونوبلات ، الايزا و ايمونوسيتوشيمي كاربرد دارند. به همين دليل ، بسياري از اين آنتي بادي هاي در كيت هاي تشخيص طبي استفاده مي شوند. با توجه به اينكه بررسي ميزان IgM انساني در سرم و مايعات بدني برخي بيماران بسيار اهميت دارد؛ لذا نياز وسيعي به كنژوگه آنزيمي آنتي بادي پلي كلونال گوسفندي ضد ايمونوگلوبولين IgM انسان احساس مي شد. توليد اين كنژوگه آنزيمي موسوم به آنتي بادي گوسفندي ضد ايمونوگلوبولين IgM انسان، كنژوگه شده با آنزيم پروكسيداز Peroxidase Conjugated Sheep Anti Human IgM براي اولين بار در ايران توسط پژوهشگاه فن آوري هاي نوين علوم زيستي جهاد دانشگاهي ابن سينا انجام شد.

خلاصه نام فرآورده: peroxidase conjugated rabbit anti – sheep Ig شماره فرآورده: SPH 224 مشخصات فرآورده: حيوان ميزبان : خرگوش ايمونوژن : ايمونوگلوبين گوسفند كه از طريق كروماتوگرافي جذبي (affinity chromatography بدست آمده است. تخليص آنتي بادي : آنتي بادي rabbit anti – sheep Ig از طريق كروماتوگرافي جذبي با استفاده از ايمونوگلوبين گوسفند متصل به sepharose – 4B تخليص گرديد. كونژوگاسيون: كونژوگاسيون آنتي بادي با HRP (horseradish peroxidase) از طريق روش پريودات با قدري تغييرات انجام گرفت. غلظت آنتي بادي: 1 mg/ml حلال: PBS(ph 7/2 , 0/15M) واجد BSA 1% وتايمروسال 01/0 % واكنش متقاطع با سرم حيوانات: ميزان واكنش با سرم بز 100% ، اسب وسگ : بيش ار 5/12 درصد ، ميمون 10% ، انسان : بيش از 6% ، خوكچه هندي : بيش از 3% ، موش 3% و با سرم مرغ كمتر از 1% مي باشد. موارد استفاده: 1. ايمونوسيتي شيمي immunocytochemistry 2. ايمونوبلاتينگ immunoblotting 3. الايزا enzyme – linked immunosorbent رقت مورد استفاده در الايزا: 1:1000 رقت مورد استفاده در الايزا با استفاده از پليت پوشيده شده با ايمونوگلوبين گوسفند با غلظت 10 µg/ml در آزمون الايزاي مستقيم بدست آمده است. مبناي انتخاب رقت كنژوله ايجاد OD حداقل 5/1 بعداز توقف واكنش و قرائت نتايج با فيلتر 492 نانومتر بوده است. نحوه نگهداري: آنتي بادي در ويالهاي كوچك در 20- درجه سانتيگراد نگهداري كرده و از منجمد كردن و ذوب كردن آن به طور متوالي خودداري كنيد. كيفيت اين فرآورده به تاييد آزمايشگاه رفرانس وزارت بهداشت، درمان و آموزش پزشكي رسيده است.

نام فراورده : peroxidase conjugated sheep anti mouse Ig شماره فراورده: SPH 101 مشخصات فرآورده حيوان ميزبان: گوسفند ايمونوژن: ايمونوگلوبين موش كه از طريق كروماتوگرافي جذبي (affinity chromatography) بدست آمد. تخليص آنتي بادي: آنتي بادي sheep anti mouse Ig از طريق كروماتوگرافي جذبي با استفاده از Ig موش متصل به sepharose-4B تخليص گرديد. كونژوگاسيون: كونژوگاسيون آنتي بادي با HRP(horseradish peroxidase) از طريق روش پريودات با قدري تغييرات انجام گرفت. غلظت آنتي بادي: 1/13 mg/ml حلال: PBS(ph 7/2 0/15M) واحد BSA 1% و تايمروسال 01/0 % واكنش سرم با سرم حيوانات: ميزان واكنش متقاطع با سرم رت: 50%، خوكچه هندي 25% ، گ كمتر از 25% ، انسان 5% ، گربه واسب 2% ، مرغ 1% و با سرم خرگوش كمتر از 1% مي باشد. موارد استفاده: 1. ايمونوسيتي شيمي immunocytochemistry 2. ايمونوبلاتينگ immunoblotting 3. الايزا enzyme – linked immunosorbent assay رقت مورد استفاده در الايزا: 1:750 رقت مورد استفاده در الايزا با استفاده از پليت پوشيده شده با ايمونوگلوبولين موش با غلظت 10 µg/ml در آزمون الايزاي مستقيم بدست آمد. مبناي انتخاب رقت كونژوله ايجادOD حداقل يك سال و نيم بعد از توقف واكنش و قرائت نتايج با فيلتر 492 نانومتر بوده است. نحوه نگهداري: آنتي بادي را در ويال هاي كوچك در 20- درجه سانتيگراد نگهداري كرده و از منجمد كردنو ذوب كردن آن به طور متوالي خودداري كنيد. كيفيت اين فرآورده به تاييد آزمايشگاه رفرانس وزارت بهداشت درمان و آموزش پزشكي رسيده است.